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之前有很多报道表明新城疫病毒在SPF鸡胚中增殖病毒的效果要远远高于在普通低免鸡胚,对于禽流感病毒在SPF鸡胚和低免鸡胚之间的对比还比较少见。而本试验以重组禽流感病毒(H5N1亚型Re-5株)为研究对象,模拟禽流感灭活疫苗生产,通过以SPF鸡胚和普通生产用低免鸡胚分别为生产原料制备灭活油乳苗,从生产的各个阶段到最后成品的免疫效果进行全程进行数据对比分析。从SPF鸡胚与普通生产用低免鸡胚母源抗体及尿囊液无菌检验对比可知普通生产用低免鸡胚存在不同程度的母源抗体而SPF鸡胚均不存在,普通生产用低免鸡胚三个抽检结果中仅1/3无菌生长,而SPF鸡胚的三个批次抽检结果均为3/3无菌生长。通过不同种毒稀释倍数接种SPF鸡胚试验可知,接种SPF鸡胚所用种毒的稀释倍数选取100万为最佳,可以达到灭活疫苗生产用毒株的标准,并且可提高种蛋的利用率,降低生产成本。符合禽流感病毒低致病力特征,对禽类和哺乳动物高度安全,免疫效力高,且适合利用鸡胚大量增殖。本试验采用全手工接种、收获的鸡胚尿囊液,经过初滤去除大分子的杂质,以避免尿囊液中大颗粒分子对灭活剂的消耗。为了能尽可能减少灭活剂甲醛的添加量而又能保证抗原的灭活检验及无菌检验合格,对常规抗原和试验抗原抽样,分别选取0.15%和0.20%两个甲醛浓度进行灭活,以SPF鸡胚生产的试验抗原能够比以普通生产用低免鸡胚生产的常规抗原以更低的甲醛含量达到灭活的目的。半成品检验数据对比中试验抗原灭活前HA、灭活后HA及EID50三项数据均优于常规抗原。以普通生产用低免鸡胚和SPF鸡胚为生产原料模拟禽流感灭活疫苗操作工艺生产抗原并加以各种乳化剂,按照配方的设计,用乳化泵进行充分搅拌制成的油乳剂灭活疫苗,经过物理性状检验,所制的两种疫苗均是乳白色的油包水剂型,粘度小、均一稳定。通过无菌和安全检验,鸡只均无发生任何不良影响,证明两种疫苗对检验鸡均安全。以SPF鸡胚生产的试验灭活疫苗与以普通生产用低免鸡胚生产的常规灭活疫苗相比,各部分HI抗体水平均高于后者。经免疫持续期抗体消长规律的分析发现,试验疫苗HI抗体产生更为稳定,免疫应答符合油乳剂灭活疫苗的要求。通过原料检验、半成品检验和成品检验三个阶段进行数据对比,为目前我国禽流感灭活疫苗生产中提高抗原效价提供技术参考,为今后禽流感灭活疫苗的发展、提高质量寻求新的途径提供试验数据,促进我国兽用生物制品的研制和开发。