外源性MiRNA-125a-5p agomir对大鼠脊髓损伤后自噬及运动功能的影响

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目的外源性注射miRNA-125a-5p agomir,旨在探讨miRNA-125a-5p对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后细胞自噬的影响及其运动功能恢复的机制研究。方法成年雄性SD大鼠(体质量150-180 g)随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤组(SCI组)、鞘内注射MiRNA空载基因组(NC组)、鞘内注射miRNA-125a-5p agomir组(MiRNA组)。采用蛋白印迹和免疫荧光实验检测各组大鼠SCI后自噬相关蛋白(Beclin1、LC3B)及PI3K-AKT-mTOR通路相关蛋白(mTOR、AKT、PI3K、p-mTOR、p-AKT、p-PI3K)表达情况。通过尼氏染色及BBB评分判断各组大鼠脊髓前角运动神经元的存活数量及运动功能的恢复情况。结果术后第3天,相比于SCI组与NC组,MiRNA组大鼠术后Beclin1、LC3B的蛋白表达显著升高(均P<0.05),mTOR及p-mTOR蛋白表达显著降低(均P<0.05)。免疫荧光结果显示,相比于SCI组与NC组,MiRNA组LC3B阳性细胞表达数量明显升高(均P<0.05)。相比于SCI组与NC组,MiRNA组大鼠脊髓前角运动神经元的存活量明显升高(均P<0.05)。BBB评分结果表明MiRNA组大鼠运动功能恢复明显高于SCI组与NC组(均P<0.05)。结论miRNA-125a-5p agomir可以通过靶向抑制mTOR蛋白相对表达量,增强SCI大鼠的自噬水平,进而促进大鼠SCI后运动功能的恢复。
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