【摘 要】
：
目的旨在研究Micro RNA-196b-5p（mi R-196b-5p）和水通道蛋白4（aquaporin 4,AQP4）在大鼠脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后表达量变化及mi R-196b-5p对继发性水肿、星形胶质细胞增生、瘢痕形成和神经元轴突再生影响,为SCI的治疗寻找新思路、新方法。方法雌性成年SD大鼠180只,体质量180~220g,随机分为假手术组（Sham
论文部分内容阅读
目的旨在研究Micro RNA-196b-5p（mi R-196b-5p）和水通道蛋白4（aquaporin 4,AQP4）在大鼠脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后表达量变化及mi R-196b-5p对继发性水肿、星形胶质细胞增生、瘢痕形成和神经元轴突再生影响,为SCI的治疗寻找新思路、新方法。方法雌性成年SD大鼠180只,体质量180~220g,随机分为假手术组（Sham组）和脊髓损伤组（SCI组）,采用改良后大鼠脊髓挤压装置以大鼠T10脊髓为中心,35g、直径2mm的无菌铁棒挤压5分钟诱导大鼠脊髓中度损伤,Sham组仅实行椎板切除术。术后采用实时荧光定量PCR法（RT-q PCR）比较Sham组和SCI组不同时间点（1d、2d、3d、5d和7d）mi R-196b-5p和AQP4 m RNA表达量变化,双荧光素酶报告检测mi R-196b-5p与AQP4之间靶向关系;将大鼠分为假手术组（Sham组）、脊髓损伤组（SCI组）、agomi R-196b-5p干预组（mi RNA组）及阴性对照组（NC组）,每组36只,诱导中度脊髓损伤后,立即通过鞘内注射的方法分别向各组大鼠髓鞘内注射等体积的生理盐水、agomi R-196b-5p及antagomi R-196b-5p连续3d。各组大鼠于损伤后第1d、3d、7d、14d、21d及28d采用Basso-Beattie-Bresnahan scores（BBB评分）评价大鼠后肢运动功能情况;SCI后3天,采用干湿重法检测各组大鼠脊髓水含量变化,RT-q PCR法检测mi R-196b-5p和AQP4 m RNA含量变化,蛋白印迹法、免疫荧光法检测AQP4、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）蛋白表达;SCI后4周,采用蛋白印迹法检测各组大鼠生长相关蛋白（growth-associated protein-43,GAP-43）,苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色检测脊髓胶质瘢痕空洞大小。结果SCI后,mi R-196b-5p表达量明显下降,AQP4明显上升,两者呈负相关,双荧光素酶报告显示AQP4是mi R-196b-5p的靶基因。鞘内注射3天后,与SCI组和NC组相比,mi RNA组在大鼠SCI后3、7、14、21和28天BBB评分明显增高（3d P＜0.05,7d、14d、21d及28d均P＜0.01）,SCI组、mi RNA组、NC组脊髓损伤区含水量、AQP4 m RNA表达量、AQP4、GFAP、PCNA蛋白表达量较Sham组显著增高（均P＜0.01）;与SCI组及NC组相比,mi RNA组脊髓含水量显著减少（均P＜0.01）,mi R-196b-5p表达量明显升高（均P＜0.01）,AQP4 m RNA表达量明显下降（均P＜0.01）,AQP4、GFAP、PCNA蛋白表达量明显减低（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01）。此外,SCI 4周后,Sham组GAP-43表达极低,与Sham组相比,SCI组、mi RNA组及NC组GAP-43表达量显著增高（均P＜0.01）,与SCI及NC组相比,mi RNA组GAP-43表达明显升高（均P＜0.01）,脊髓空洞面积明显减小（均P＜0.01）。结论Mi R-196b-5p在SCI后表达量明显增高,在转录水平抑制AQP4的表达,减轻SCI后继发性水肿并抑制星形胶质细胞的增生活化,减少胶质瘢痕的形成,有效的促进了神经元轴突的损伤后再修复,进而促进大鼠后肢运动功能的恢复。
其他文献
目的探究脊髓损伤后锌离子治疗对脊髓和神经元糖代谢进行调控的分子机制以及对小鼠运动功能的恢复作用。方法我们首先利用H2O2构建了细胞氧化应激模型,利用Allen’s打击法建立了小鼠SCI模型,以评估锌离子在体外和体内的治疗作用。葡萄糖的转运和葡萄糖的利用（保护线粒体）对葡萄糖代谢至关重要,所以本实验从葡萄糖摄取和线粒体保护两个方面入手。检测葡萄糖摄取:在体外,通过WB和免疫荧光检测了葡萄糖转运蛋白的
目的探讨长链非编码RNA RMRP（lnc RNA-RMRP）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞中的表达。研究RMRP基因对NSCLC细胞增殖侵袭能力的影响并探讨其作用机制,旨在明确RMRP基因在非小细胞肺癌发生发展中的作用。探讨RMRP基因是否通过靶向调控mi R-1-3p表达影响NSCLC细胞增殖和凋亡,为NSCLC的靶向治疗提供新的思路。方
目的评估丹参酮ⅡA干预对缺氧条件下心肌前体细胞存活和归巢能力的影响并探讨其相关机制,期望为丹参酮ⅡA在心肌再生中的应用提供有价值的理论和实验依据。方法1、用不同浓度的氯化钴（50、100、150、200、250、300μmol/L）处理大鼠胚胎心肌H9c2细胞48h,用MTS法评估氯化钴对H9c2细胞增殖的影响,流式细胞法分析氯化钴对H9c2细胞凋亡的影响,根据检测结果选择合适浓度的氯化钴进行后续
目的探究积雪草酸（Asiatic acid,AA）对乳腺癌4T1细胞的增殖、迁移及凋亡作用的影响,并探讨活性氧（Reactive oxygen species,ROS）在AA诱导4T1细胞凋亡中的作用。方法1、MTT法检测不同浓度的AA对乳腺癌4T1细胞增殖的影响,筛选出有效药物浓度用于后续实验研究;40μmol·L-1的AA处理后,通过集落形成实验观察4T1细胞克隆形成能力变化。2、为探究AA是
在发现叉角厉蝽对烟青虫幼虫具有较好捕食能力的基础上，在室内测定了不同虫态叉角厉蝽对烟青虫3龄幼虫的捕食能力，通过拟合HollingⅡ型功能反应模型，研究了不同虫态叉角厉蝽之间对烟青虫幼虫捕食能力的差异以及不同猎物密度对叉角厉蝽捕食能力的影响。结果表明，叉角厉蝽3、4、5龄若虫和雌成虫对烟青虫3龄幼虫的捕食功能反应都符合HollingⅡ圆盘方程，其中叉角厉蝽5龄若虫具有最强的捕食能力，对烟青虫3龄幼
目的三阴性乳腺癌（Triple Negative Breast Cancer;TNBC）是乳腺肿瘤的一种特殊亚型。由于雌激素受体（Estrogen Receptor;ER）、孕激素受体（Progesterone Receptor;PR）和人表皮生长因子受体2（Human Epidermal Growth Factor Receptor;HER2）的阴性表达,目前没有特异性靶向治疗方法。此外,PI3
目的胶质瘤是人类中枢神经系统最常见和最恶性的肿瘤。其高度转移性和浸润性给临床治疗带来重大挑战。过往手术结合放疗和化疗的治疗方案效果不好,病人生存率低。因此,深入探究胶质瘤发生、发展的分子机制,通过其生物标志物和靶点尽早进行诊断与干预,成为胶质瘤研究的又一热点。CDX2基因是一种特异性的核转录因子,既往研究报道其以多种方式参与肿瘤的发生和发展。但CDX2在不同肿瘤中的作用不尽相同,在部分肿瘤中发挥出
目 的浅低温停循环联合下半身灌注行全主动脉弓置换术可能裨益于急性 Stanford A 型主动脉夹层（acute Stanford type A aortic dissection,ATAAD）患者预后,我们团队前期围绕单一胸骨上段小切口中度/浅低温下行全主动脉弓置换术开展了系列研究,初步证明了该方法的安全性及有效性。然而,ATAAD仍属心血管疾病中的急危重症,其外科手术治疗手术时间、体外循环时间
马克思主义宗教学建设是中国宗教学学科体系、学术体系和话语体系建设的基础工程，必须准确定位宗教在中国的实际功能，处理好马克思主义宗教观与中国传统宗教观、马克思主义宗教观经典论述与中国宗教工作实践经验、尊重群众宗教信仰和依法治理宗教事务三组关系。荀子的“君子以为文，百姓以为神”可以概括中国传统宗教观的“人文立本”特点，儒家主要是将祭祀纳入崇德报功的礼教范畴、教化目的；这种以“文”统“神”与马克思主义宗
目的分析膀胱癌和癌旁组织中差异表达的微小RNAs（micro RNAs,miRNAs）的差异性表达情况,选取其中差异性表达最为明显的miR-181c-5p作为研究对象,分析miR-181c-5p在膀胱癌细胞中的生物学功能,并探讨miR-181c-5p可能结合的靶点,为膀胱癌的早期诊断和后期治疗提供新的可能性依据。方法收集膀胱癌患者的膀胱癌组织和临近组织标本,通过miRNA芯片筛查出其中差异性表达的