目的:本实验通过建立大鼠肾脏缺血-再灌注损伤模型,观察不同剂量瑞芬太尼对肾脏组织学、肾功能及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和Ca2+-ATP酶含量的影响,以探讨其对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤的作用及机制,为临床麻醉用药提供参考。方法:健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠60只,随机分为5组:对照组(S)、模型组(M)、低剂量瑞芬太尼组(RL)、中剂量瑞芬太尼组(RM)、高剂量瑞芬太尼组(RH),每组12只。M组即肾脏缺血-再灌注损伤模型组,此模型参照Basile等方法建立:大鼠麻醉成功后固定,待肝素化(5U/ml)后行尾静脉穿刺置管用于药物输注。腹部正中切口,显露和游离肾脏,分离肾动脉,保护输尿管,用无损伤血管夹夹闭双侧肾动脉,阻断左右肾动脉造成肾缺血,关闭腹腔。夹闭双侧肾动脉45min后,再次打开腹腔,显露肾脏,松开动脉夹(即再灌注),如肾脏从暗紫色转成红色说明肾缺血-再灌注损伤模型建立成功。如松开血管夹5min后肾脏未转变为正常红色,则作为再灌注未成功剔出实验。实验过程中物理方法保温,实验结束逐层缝合。S组只暴露双侧肾动脉但不予夹闭。RL、RM、RH组除与M组上述操作相同外,在缺血前15min通过尾静脉持续输注瑞芬太尼,速度分别为0.2μg·kg-1·min-1、0.6μg·kg-1·min-1、1.0μg·kg-1·min-1,直至再灌注30min时停止输注,而S、M组则输注等容量的生理盐水。每组于再灌注30min(T1)、24h时(T2)经股静脉取血各1ml,静置后离心,测定血清尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)含量。并于再灌注24h时处死大鼠,迅速取左肾上极组织,按所测生化指标要求制备相应组织匀浆,进行以下指标测定:用考马斯亮蓝法测定组织蛋白含量,硫代巴比妥法测定MDA含量,黄嘌呤氧化法测定SOD活性,无机磷显色光电比色法测定Ca2+-ATP酶活性,上述所测指标均用组织蛋白含量校正。另取左肾下极组织制作光、电镜标本,光镜下观察肾脏组织结构的改变,透射电镜下观察肾组织超微结构的变化。结果:60只大鼠均进入实验结果分析:1肉眼观察:S组皮质红褐色,髓质较皮质色浅。M组皮质苍白,髓质瘀血颜色深暗。RH组肾脏外观接近S组。RM、RL组外观改变较M组减轻。2光镜观察:S组肾小球无变形皱缩,肾小管上皮细胞无水肿、肾小管管腔未变窄,肾间质无充血及炎性细胞浸润。M组肾小球变形皱缩,肾小管上皮细胞空泡变性、细胞片状坏死,肾小管管腔变窄,其内出现细胞碎片或管型形成,肾间质可见出血和炎性细胞浸润。RH组肾小球基本正常,肾小管上皮细胞轻度水肿,肾小管管腔未变窄,肾间质少量炎性细胞浸润。RL组肾小球轻度皱缩,肾小管上皮细胞重度水肿,肾小管管腔变窄,肾间质大量炎性细胞浸润。RM组病理学变化介于RL组与RH组之间。3电镜观察:S组肾小管细胞核形态完整,无肿胀,大量线粒体存在,无空泡变性,嵴无断裂。M组的肾小管细胞核严重变形、线粒体变形、肿胀、破碎。RH组肾小管细胞核形态基本正常,线粒体嵴稍扩张。RL组细胞核形态基本完整,大部分线粒体肿胀,部分嵴消失、破碎。RM组的超微结构变化介于RL组与RH组之间。4血BUN和Scr含量:与S组比,M、RL、RM和RH组二指标均升高(P<0.01)。与M组比,RL、RM和RH组均降低(P<0.01)。与RL组比,RM和RH组均降低(P<0.01)。与RM组比,RH组降低(P<0.01)。M、RL、RM和RH组T2时点的二指标均较T1时点的高(P<0.05或0.01)。S组T2时点的上述两指标与T1时点比较差异无统计学意义(P>0.05)。5肾组织MDA含量和SOD活性:与S组比,M、RL、RM和RH组MDA含量均升高,SOD活性均降低(P<0.01)。与M组比,RL、RM和RH组MDA含量均降低,SOD活性均升高(P<0.05或0.01)。与RL组比, RM和RH组MDA含量均降低(P<0.01),SOD活性均升高(P<0.05或0.01)。与RM组比,RH组MDA含量降低,SOD活性升高(P<0.01)。6肾组织Ca2+-ATP活性:与S组比,M、RL、RM和RH组均降低(P<0.05或0.01)。与M组比,RL、RM和RH组均升高(P<0.05或0.01)。与RL组比,RM和RH组均升高(P<0.05或0.01)。与RM组比,RH组升高(P<0.01)。结论:经大鼠尾静脉输注三种剂量瑞芬太尼均可减轻肾脏缺血-再灌注损伤,其中以1.0μg·kg-1·min-1持续静脉输注为宜。瑞芬太尼减轻肾缺血-再灌注损伤的机制与其抑制细胞脂质过氧化反应,提高Ca2+-ATP酶活性,减轻钙超载有关。