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目的:对人涎腺腺样囊性癌(ACC)与正常涎腺组织P53,P16mRNA与蛋白表达情况进行比较研究。应用基因芯片对涎腺腺样囊性癌高转移ACC-M和低转移ACC-2以及低分化来源的粘液表皮样癌MEC-1进行基因筛查,并对三种重要的差异基因进行实时定量PCR检测,以便为临床早期诊断和合理治疗提供依据。
方法:收集6例人涎腺腺样囊性癌患者的肿块和其周围正常鳃腺组织采用逆转录PCR(RT-PCR)技术,对肿瘤组织和正常涎腺组织P53与P16mRNA表达进行研究后,进一步采用蛋白质印记(westernblot)技术对两种组织的P53与P16蛋白表达研究。采用基因芯片技术研究高、低转移涎腺腺样囊性癌和涎腺粘液表皮样癌三者之间肿瘤耐药与代谢基因之间的差异条带,从中选出三个重要的基因,利用实时定量PCR进行检测。
结果:人涎腺腺样囊性癌细胞与正常涎腺细胞细胞相比其P53基因mRNA,及其蛋白表达均显著增高,P16基因mRNA,及其蛋白表达显著降低甚至缺失。结论:P53基因的过度表达或者P16基因的阴性表达二者都可以成为诊断ACC的好的肿瘤标记物。基因芯片结果表明:RNA浓度分别为ACC-M1.19μg/μl,ACC-21.07μg/μl,MEC-11.82μg/μl。MDR1基因含量MEC-1>ACC-M>ACC-2:MRP1基因含量ACC-M>ACC-2>MEC-1;CCD1基因含量ACC-2>MEC-1>ACC-M。
结论:P53,P16基因的联合应用对于诊断具有ACC疾病的患者具有重要意义。MEC-1耐药性与MDR1基因含量较高相关。ACC-M高转移性与MRP1基因含量较高和CCD1基因含量较低相关。ACC-2低转移性与MRP1基因含量较少相关。