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本研究以中美山杨(Populus davidiana×P.tremuloides)优良杂种无性系为试验材料,建立和完善其组培繁殖体系,探索杂种山杨试管苗形态建成的条件及规律,同时,对其组培生根过程中几种植物生理指标进行较深入的研究。通过试验得出以下结论:1.杂种山杨组培繁殖体系:杂种山杨芽最佳消毒方法是70%~75%乙醇浸泡10~20s,0.1%氯化汞消毒3min左右;最佳繁殖途径是以腋芽作为外殖体离体快繁;山杨芽最适分化培养基为NT+6-BA1.0mg/l+KT0.3mg/l+2%蔗糖,分化率可高达87%,分化系数为4.23;最佳增殖培养基为WM+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L+2%蔗糖;组织培养中高温、透气性差的塑料膜、光强不足等因素均显著促进玻璃化苗的发生,其中封口材料是玻璃化发生的主要因子;最佳生根培养基为WM+IBA1.5mg/L+NAA0.01mg/L+2%蔗糖,生根率高达88.9%,每苗生根数可高达14条。在对组培生根影响因素的研究中发现,增殖培养时间对生根率以及生根条数的影响差异极显著,增殖培养30d~35d的试管苗生根能力最强;带茎尖的茎段与不带茎尖的茎段在生根率、生根时间、生根条数方面都没有显著差异;由遗传因素决定,山杨不同无性系生根能力存在差异,各无性系生根能力依次为ZM3>ZM1>ZM6>ZM7>ZM9>ZM2>ZM4>ZM10>ZM8>ZM11>ZM5;移栽应选择茎基部无愈伤组织,根生长粗壮、无污染的健壮苗,移栽基质为1/2珍珠岩+1/2壤土,移栽后5天内湿度维持在70%以上,并且每天喷雾2次,成活率最高可达90%。2.理化因素对试管苗生根的影响:针对杂种无性系生根难易的不同,在试管苗生根期间对4种内源激素的含量、可溶性蛋白的含量、过氧化物酶和多酚氧化酶的活性以诱导时间为梯度进行了跟踪测定。研究表明生根率与初始内源IAA、ZR含量呈正相关,与初始ABA、GA含量呈负相关,有且只有IAA与生根率相关性显著,说明内源IAA是影响中美山杨杂种无性系生根的主要因素;难易生根无性系根原基分化发生的过程中可溶性蛋白含量都升高,易生根的ZM3可溶性蛋白含量变化较大,而难生根的ZM5可溶性蛋白含量变化小,根伸长期可溶性蛋白含量程序性的减少,说明特异性蛋白表达的多少与次生根生长有关;在根原基形成过程中初始PPO活性强弱与生根能力呈正比,生根能力不同的各无性系PPO活性没有规律性;在根原基开始形成期间POD活性都出现一个最低值,活性越低,生根率越高,说明POD活性的降低对生根起着促进的作用。