【摘 要】
：
目的:在临床上,慢性疼痛患者伴发抑郁的比例高达30%～60%,而在严重抑郁症的患者中,共患慢性疼痛的发生率亦较高,这两种疾病中的每一种都会积极地促进另外一种的发展。然而令人遗憾的是,目前有关慢性疼痛致抑郁的中枢神经系统结构与功能基础仍不够明确,相应的临床治疗策略受限且缺乏针对性。外侧缰核（lateral habenular,LHb）是边缘系统与基底神经节环路的一个信息汇合点,是同时参与疼痛感知、负
论文部分内容阅读
目的:在临床上,慢性疼痛患者伴发抑郁的比例高达30%～60%,而在严重抑郁症的患者中,共患慢性疼痛的发生率亦较高,这两种疾病中的每一种都会积极地促进另外一种的发展。然而令人遗憾的是,目前有关慢性疼痛致抑郁的中枢神经系统结构与功能基础仍不够明确,相应的临床治疗策略受限且缺乏针对性。外侧缰核（lateral habenular,LHb）是边缘系统与基底神经节环路的一个信息汇合点,是同时参与疼痛感知、负性情绪形成的中枢战略要塞,但LHb是否参与慢性疼痛伴发抑郁的调节尚不清楚。T型钙通道（T-type voltage-gated calcium channels,T-VGCC）在中枢和外周神经系统广泛表达,参与调控神经元兴奋性,其异常活动与情绪障碍、疼痛等密切相关。近年有研究发现,全身或LHb局部注射T-VGCC阻断剂可缓解疼痛或抑郁样表型。那么,慢性疼痛是否通过改变LHb的T-VGCC表达与功能、进而影响其活性进而导致抑郁呢?为了回答这一问题,本实验通过建立完全弗氏佐剂（complete Freund’s adjuvant,CFA）诱导的慢性炎性疼痛伴发抑郁模型,以LHb脑区的T-VGCC表达与功能变化为研究重点,探究慢性炎性疼痛伴发抑郁的中枢机制。方法:选取C57BL/6J野生型（Wild-type,WT）雄性小鼠（8 w,20–30g）,实验组（CFA组）在实验开始的第0 d和第10 d分别在小鼠左足底皮下注射10 ul CFA构建慢性炎性疼痛模型,对照组（Sham组）在同时期同部位注射相同体积生理盐水,持续观察小鼠体重和注射部位足底厚度。评估注射前和注射后第1、3、6、9、12、14、21、28、35、42、49及56 d机械缩足阈值（paw withdrawal threshold,PWT）和热缩足潜伏期（paw withdrawal latency,PWL）。同时,在注射CFA后机械痛敏存在时期（CFA注射后2 w、3 w）和恢复时期（CFA注射后8 w）检测小鼠焦虑抑郁样行为,明确CFA诱导的慢性炎性疼痛伴发抑郁的时间规律。首先,在慢性疼痛伴发抑郁时期,使用免疫组化和电生理技术观察LHb脑区神经元活动标志蛋白C-Fos的表达和神经元兴奋性改变情况。其次,在明确生理状态下LHb脑区T-VGCC各亚型（Ca V3.1、Ca V3.2、Ca V3.3）的表达情况以及T-VGCC对LHb神经元兴奋性调控的作用。最后运用免疫印迹和电生理技术明确LHb的T-VGCC在慢性炎性疼痛伴发抑郁时期的表达和功能变化情况。结果:1.在CFA注射1 d后,注射部位出现明显的红肿,并持续至少8 w;CFA注射后3 w小鼠体重增长较Sham组显著减慢;与Sham组相比,CFA小鼠的PWT在注射1 h后显著下降,注射后第28 d开始回升,直至第42 d恢复至Sham水平;CFA小鼠的PWL在注射后第1 h显著下降,但在第9 d观察到明显的恢复,于第10 d注射了第二次CFA后,CFA小鼠的热痛阈在第21天恢复至Sham水平,仍比机械痛阈恢复更早。2.CFA注射后3 w,小鼠出现焦虑抑郁样表型,并且在机械痛敏恢复之后即CFA注射后8 w仍可观察到小鼠的焦虑抑郁样行为。3.与Sham组相比,在CFA注射后3 w,LHb脑区C-Fos计数增多,神经元兴奋性增加。4.免疫荧光化学染色结果显示在LHb内Ca V3.1-Ca V3.3均有表达,Ca V3.1和Ca V3.3的荧光强度分别是Ca V3.2荧光强度的1.527倍和1.530倍;三种亚型均表达于神经元上。5.离体脑片灌注T-VGCC阻断剂Ni Cl2可以显著降低LHb神经元兴奋性。6.与Sham组相比,在CFA注射后3 w,LHb的T-VGCC各亚型表达无明显异常,但T钙电流（IT）振幅和电流密度上调。结论:综上,1.本研究发现CFA慢性炎性疼痛小鼠伴发焦虑抑郁表型具有时间依赖性,疼痛与情绪障碍可以共存与分离。2.本实验证实T-VGCC的功能增强导致的LHb神经元兴奋性上调是参与慢性炎性疼痛伴发抑郁发生发展的中枢机制之一。
其他文献
目的:利用Cre/lox P技术获得的骨髓细胞CCR3基因条件性敲除小鼠构造变应性鼻炎模型,观察实验小鼠鼻黏膜病理和黏液分泌情况,测定骨髓、外周血、鼻黏膜样本中CCR3、CD34差异表达情况,骨髓、外周血、鼻腔灌洗液（NALF）中CD34+祖细胞、CD34+CCR3+祖细胞、嗜酸性粒细胞（Siglec-F+CCR3+）比例变化,血清中嗜酸性粒细胞脱颗粒释放介质（嗜酸性粒细胞阳离子蛋白-ECP和嗜酸
目的:探讨乳酸预处理通过调节自噬减轻ARPE-19细胞以及视网膜氧化应激损伤的保护机制方法:1、CCK-8检测法检测H2O2对ARPE-19细胞的损伤浓度和时间,以及筛选乳酸预处理的保护浓度和时间。Western Blot法分别检测不同浓度H2O2以及联合乳酸预处理对ARPE-19细胞中LC3II、LC3I蛋白表达水平。2、自噬抑制剂3-MA抑制乳酸预处理诱导的自噬,Western Blot检测细
背景及目的:鼻咽癌是一类多见于中国南方等地的头颈部恶性肿瘤,与遗传因素、环境改变及EB病毒感染等多种因素有关。目前鼻咽癌的治疗方法主要采用以放疗为主的综合治疗,但由于其起病隐匿,具有高度侵袭性和转移性且周围解剖复杂的特点,导致患者预后不佳。因此,深入探索鼻咽癌可能的治疗靶点对改善鼻咽癌患者的治疗效果和预后生存质量有重要意义。miRNA在多种生理及病理过程中起着重要作用,研究证实miR-29b-3p
研究背景:近年来,胸部恶性肿瘤的放射性治疗（Radiation Therapy,RT）所引起的放射性心脏损伤（Radiation-Induced Heart Disease,RIHD）成为了人们的关注焦点。在其发病过程中,氧化应激（Oxidative Stress,OS）发挥了非常重要的作用。白藜芦醇（Resveratrol）是具有抗氧化性的天然非黄酮类多酚化合物,先前研究已经证实Resverat
背景及目的:鼻咽癌是我国高发恶性肿瘤之一,与遗传、环境、病毒有着密切关系,多发生于鼻咽部咽隐窝及顶后壁,早期症状不典型,易发生误诊,且常伴远处转移、预后不良。因此,探究鼻咽癌可能的发病机制及新的作用靶点,对疾病的治疗有重要意义。miR-125a-5p是miRNA家族一员,已被证实参与各种癌症的发展,包括肝细胞癌、肺癌和前列腺癌等,但在鼻咽癌中确切的相关作用和机制没有明确报道。TRAF6是一种E3泛
背景:脓毒症晚期机体将诱导淋巴细胞高表达PD-1通过多种途径如干扰淋巴细胞能量代谢、蛋白合成、诱导淋巴细胞凋亡和耗竭来负性调控淋巴细胞的免疫活动以维护机体的抗炎和促炎反应的平衡[1,2]。肠道作为脓毒症最常损伤器官之一,其损伤表现主要为肠道细菌屏障、黏液层Ig A、黏膜屏障破坏,肠道正常菌群失衡、细菌移位致使脓毒症患者晚期容易因肠源性感染而死亡,脓毒症肠道损伤具体机制尚不清楚,目前认为炎症、脓毒症
目的:作为临床常见急危重症之一的急性肺损伤（Acute lung injury,ALI）,一直以来都因高发病率、高死亡率给人民的生命健康造成严重威胁。由于各种内源性、外源性致病因素都可造成ALI的发生,并且其发病机制尚未明确,使得临床始终缺乏针对性治疗手段,故探索新的ALI防护措施迫在眉睫。本课题通过气道内滴注脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）建立ALI小鼠模型,探讨e TA
目的:比较不同结构的黄酮醇类化合物预处理剂对牙本质粘接耐久性的影响。方法:收集120颗无龋坏牛门牙,暴露唇侧牙本质,35%磷酸酸蚀15 s,蒸馏水冲洗15 s后,随机分为4组（n=30）,分别应用无水乙醇（对照组）、非瑟酮（非瑟酮组）、槲皮素（槲皮素组）、杨梅素（杨梅素组）对牙本质进行预处理1 min,依次使用酸蚀-冲洗系统粘接剂,复合树脂进行粘接。应用万能力学试验机对上述各组样本分别进行即刻和胶
研究背景:卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤,细胞减灭术和基于铂类和紫杉烷的联合化疗一直是卵巢癌的主要治疗方式。然而,由于多药耐药性使肿瘤化疗疗效常常受到限制。化疗耐药是影响卵巢癌患者预后的关键因素,尤其是铂类耐药性。其中,顺铂（DDP）耐药仍然是改善卵巢癌患者临床结果的关键挑战。因此,迫切需要可用于早期预测卵巢肿瘤化疗耐药特性的新的生物标志物和逆转耐药性的治疗策略。Hedgehog（Hh）信号通路是胚
研究目的:视网膜血管生成指从已有的毛细血管网发展而形成新的血管,是调节内皮细胞（endothelial cells,ECs）功能的复杂过程,其涉及的病理过程包括新生血管性疾病,如糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病变、年龄相关性黄斑变性等,是引起视力损害的主要原因。血管内皮生长因子（Vascular endothelial gro wth factor,VEGF）是视网膜血管生成中的关键调节因子。组