【摘 要】
：
目的:利用Cre/lox P技术获得的骨髓细胞CCR3基因条件性敲除小鼠构造变应性鼻炎模型,观察实验小鼠鼻黏膜病理和黏液分泌情况,测定骨髓、外周血、鼻黏膜样本中CCR3、CD34差异表达情况,骨髓、外周血、鼻腔灌洗液（NALF）中CD34+祖细胞、CD34+CCR3+祖细胞、嗜酸性粒细胞（Siglec-F+CCR3+）比例变化,血清中嗜酸性粒细胞脱颗粒释放介质（嗜酸性粒细胞阳离子蛋白-ECP和嗜酸
论文部分内容阅读
目的:利用Cre/lox P技术获得的骨髓细胞CCR3基因条件性敲除小鼠构造变应性鼻炎模型,观察实验小鼠鼻黏膜病理和黏液分泌情况,测定骨髓、外周血、鼻黏膜样本中CCR3、CD34差异表达情况,骨髓、外周血、鼻腔灌洗液（NALF）中CD34+祖细胞、CD34+CCR3+祖细胞、嗜酸性粒细胞（Siglec-F+CCR3+）比例变化,血清中嗜酸性粒细胞脱颗粒释放介质（嗜酸性粒细胞阳离子蛋白-ECP和嗜酸性粒细胞过氧化物酶-EPO）的差异情况;体外测定CD34+祖细胞趋化及克隆形成情况,以观察骨髓细胞CCR3基因条件性敲除对变应性鼻炎CD34+祖细胞向嗜酸性粒细胞分化作用的影响并初步探讨其增殖、迁移的作用机制。方法:1.利用骨髓细胞特异性表达Cre重组酶的Lyz-Cre C57BL/6小鼠与CCR3fl/fl C57BL/6小鼠杂交得到骨髓细胞CCR3基因条件性敲除小鼠;2.将繁殖得到的子代C57BL/6小鼠经基因型鉴定后分为4组:骨髓细胞CCR3基因条件性敲除对照组（CB组,CCR3-CKO control blank组）、骨髓细胞CCR3基因条件性敲除变应性鼻炎组（CA组,CCR3-CKO allergic rhinitis组）、同窝野生对照组（WB组,wildtype control blank组）、同窝野生变应性鼻炎组（WA组,wildtype allergic rhinitis组）,以卵清蛋白（OVA）腹腔致敏、局部滴鼻给药激发,建立变应性鼻炎小鼠模型,对照组相同方式给予等量生理盐水;3.Western blot和qPCR检测各组小鼠骨髓、外周血及鼻黏膜中CD34和CCR3的m RNA及蛋白的表达变化;4.流式细胞术检测骨髓、外周血、NALF中CD34+祖细胞、CD34+CCR3+祖细胞、嗜酸性粒细胞（Siglec-F+CCR3+）比例变化;5.在末次鼻腔激发后的10分钟对实验小鼠进行症状评分;每次给药前称量并记录小鼠体重;6.采用HE、PAS染色检测鼻黏膜的组织病理形态及黏液分泌情况;7.应用ELISA测定血清中IL-5、eotaxin、ECP和EPO的浓度及其变化;8.a.磁珠分选CD34+祖细胞体外培养观察骨髓、外周血CD34+祖细胞迁移能力变化;b.骨髓非粘附单个核细胞（NAMNC）克隆形成情况。结果:1.成功构建骨髓细胞CCR3基因条件性敲除（CCR3-CKO）小鼠,CCR3-CKO小鼠骨髓细胞CCR3的m RNA和蛋白表达水平均明显减少;2.Western blot和qPCR结果表明,与WA组相比,CA组的小鼠骨髓、外周血中CD34和骨髓、外周血、鼻黏膜中CCR3的m RNA及蛋白表达均减低;3.流式细胞术结果表明,与WA组相比,CA组的小鼠骨髓、外周血中CD34+祖细胞、CD34+CCR3+祖细胞和骨髓、外周血、NALF中嗜酸性粒细胞（Siglec-F+CCR3+）比例均减少;4.骨髓细胞CCR3基因条件性敲除后,可减轻变应性鼻炎小鼠的症状,并在一定程度上缓解了变应性鼻炎引起的体重下降;5.HE染色显示与WA组相比,CA组小鼠鼻黏膜病理改变减轻;6.PAS染色显示与WA组相比,CA组小鼠黏液分泌减少;7.在小鼠血清中,ELISA分析发现CA组血清中IL-5、ECP和EPO水平均较WA组降低,而eotaxin水平在CA组较WA组更高;8.transwell结果表明CA组小鼠骨髓CD34+祖细胞对eotaxin的反应弱于WA组,迁移能力部分降低;9.克隆形成结果显示在IL-5和eotaxin共同刺激下可诱导WA组小鼠骨髓非黏附单个核细胞（NAMNC）克隆形成嗜酸性粒细胞,而骨髓细胞CCR3基因条件性敲除使小鼠骨髓NAMNC克隆形成能力较同窝野生型减弱。结论:骨髓细胞CCR3基因条件性敲除使变应性鼻炎小鼠骨髓CD34+祖细胞骨髓造血和原位造血能力下降;下调骨髓细胞CCR3基因可抑制骨髓CD34+祖细胞向嗜酸性粒细胞的分化,并抑制嗜酸性粒细胞在局部组织的迁移、浸润及脱颗粒作用。CCR3可能作为靶基因从造血源头上影响CD34+祖细胞向嗜酸性粒细胞分化并调控变应性鼻炎的发病。
其他文献
目的:通过提取小鼠来源的软骨细胞及骨髓来源单核细胞（Bone marrow macrophage cells,BMMs）进行体外实验,探讨安全浓度范围内的红景天苷（Salidroside,Sal）在保护软骨细胞及抑制破骨细胞活化方面的作用及其分子机制;同时通过前交叉韧带横断术（Anterior cruciate ligament transection,ACLT）建立小鼠膝关节骨性关节炎（Oste
背景与目的:骨肉瘤（OS）是一种具有高度侵袭性的恶性肿瘤,通常发生在儿童和青年人。虽然近年来骨肉瘤的临床治疗取得了相当大的成就,但骨肉瘤患者的总体生存率并没有得到明显的提高。癌细胞会优先使用糖酵解而不是氧化磷酸化来满足其能量和生物合成需求,这种现象被称为Warburg效应。糖酵解是多种癌症的一个驱动因素,并逐渐成为一种新的癌症靶向治疗方法。在本研究中,我们筛选了骨肉瘤样本的糖酵解相关基因并建立了一
目的:建立糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠模型,分离培养大鼠表皮干细胞（epidermal stem cells,ESC）。通过基因芯片和生物信息学的分析方法,探讨糖尿病大鼠皮肤和正常大鼠皮肤表皮干细胞中LncRNA和mRNA的差异表达情况及相关性,为糖尿病创面愈合提供新的思路和理论依据。方法:健康雄性SD大鼠10只,随机分为DM组和正常对照组,每组5只。DM组大鼠一次性腹腔
目的 研究和分析认知行为团体心理护理对化疗后急性白血病患儿护理中的应用效果。方法 便利选取本院2021年6月～2022年7月先后两个时间段收治并接受化疗的60例急性白血病患儿。按入院时间先后顺序分成对照组及干预组，每组均30例。对照组给予常规护理，干预组在对照组基础上联合认知行为团体心理干预，观察对比两组患儿的疾病认知水平、负性情绪、生活质量评分及护理满意度评分。负性情绪通过儿童焦虑性情绪障碍筛查
目的:回顾性分析南昌大学第一附属医院230例胃肠道间质瘤患者的临床资料,探讨胃肠道间质瘤患者的临床特点及影响预后的相关因素,为胃肠间质瘤患者的临床诊治提供参考。方法:收集南昌大学第一附属医院自2012年1月至2020年1月诊断为胃肠道间质瘤并行手术切除患者的临床资料,包括患者的基本情况、就诊症状、术后病理情况、免疫组化、基因检测结果。并通过电话方式门诊复查的方式进行随访,随访的内容包括患者术后有无
目的:阐明PAX8在子宫内膜癌中的异常表达,并分析其表达高低与子宫内膜癌临床预后的关系;检测PAX8在不同细胞系中甲基化的水平,并分析PAX8的表达水平、甲基化水平与子宫内膜癌TP53突变高拷贝数组（CNH）之间的关系;利用si RNA干扰技术在子宫内膜癌细胞中下调PAX8的表达,探究抑制PAX8后对其下游信号通路的影响和具体的分子机制。方法:1、通过生物信息学手段分析子宫内膜癌中PAX8的表达和
视网膜退行性病变是指视网膜细胞的不可逆性损伤。Müller胶质细胞（Müller glia cell,MGC）是视网膜中最主要的胶质细胞,对视网膜内其他细胞成分起着支持保护的作用,已有证据表明,在一些退行性病变的视网膜中可以发现功能失常的Müller胶质细胞。自噬在细胞内分解生物大分子的分子机制且被发现参与了视网膜退行性病变的发病过程。但是目前对于自噬是否且如何影响Müller胶质细胞功能尚不清楚
目的:研究鸦胆子素D对胶质瘤细胞增殖,迁移及凋亡的影响,并探讨相关分子机制。方法:分别用不同浓度的鸦胆子素D处理增殖期的U251细胞36小时,分为低浓度组（20umol/L）、高浓度组（40umol/L）、DMSO组、空白对照组。CCK-8实验检测各组U251细胞增殖吸光度值（OD值）;Transwell细胞迁移实验检测各组胶质细胞瘤U251迁移的细胞能力;流式细胞术评估鸦胆子素D对胶质瘤细胞凋亡
目的:通过生物信息学和机器学习的方法鉴定骨关节炎患者的滑膜诊断性生物标记物,并探究滑膜的免疫浸润情况。方法:从GEO（Gene Expression Omnibus）数据库,获得人骨关节炎滑膜成纤维细胞基因表达的4个芯片数据文件GSE29746和GSE55235,GSE55457,GSE82107作为训练集。样本实验组采自骨关节炎滑膜组织,对照组采自正常滑膜组织。下载芯片文件GSE12021作为验
背景及目的:虽然晚期胃癌患者的一线化疗方案不断优化,但其生存期仍不理想。近些年,程序性死亡蛋白1（Programmed cell death-1,PD-1）抑制剂在晚期胃癌治疗中成为一种新的选择。目前我国人口老龄化形势严重,含PD-1抑制剂方案治疗老年晚期胃癌患者的报道罕见,因此本研究旨在评估含PD-1抑制剂治疗方案在老年晚期胃癌患者的治疗中的临床疗效及安全性。方法:本研究纳入南昌大学第一附属医院