【摘 要】
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目的构建成年雄性Sprague Dawley（SD）大鼠被共生大肠杆菌感染的体内实验模型,并用3.5%牛磺胆酸钠诱导重症急性胰腺炎;检测共生大肠杆菌是否激活胰腺内质网应激,检测胰腺内质网应激相关炎症信号通路、凋亡信号通路在SD大鼠胰腺组织中的激活情况;研究共生大肠杆菌是否激活胰腺内质网应激相关的炎症信号通路及凋亡信号通路而加重重症急性胰腺炎。方法将32只SD大鼠随机分为4组:A:空白对照组;B:肠
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目的构建成年雄性Sprague Dawley（SD）大鼠被共生大肠杆菌感染的体内实验模型,并用3.5%牛磺胆酸钠诱导重症急性胰腺炎;检测共生大肠杆菌是否激活胰腺内质网应激,检测胰腺内质网应激相关炎症信号通路、凋亡信号通路在SD大鼠胰腺组织中的激活情况;研究共生大肠杆菌是否激活胰腺内质网应激相关的炎症信号通路及凋亡信号通路而加重重症急性胰腺炎。方法将32只SD大鼠随机分为4组:A:空白对照组;B:肠道微生物正常组;C:肠道微生物减少组;D:肠道微生物减少+MG1655灌胃组。C、D组均予以联合使用四种抗生素灌胃;D:组予以大肠杆菌MG1655灌胃;最后,除A组外,其余各组均用3.5%牛磺胆酸钠诱导重症急性胰腺炎,A组仅开腹翻动胰腺,重症急性胰腺炎诱导24h后处死大鼠。利用Western Blot法检测以下指标:结合免疫球蛋白（Bip）、活化转录因子6（ATF6）、蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、肌醇酶1（IRE1）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-12、细胞核因子-κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子（TNF-α）;将胰腺组织切片,然后用HE染色,最后用显微镜观察并分析其病理学改变,并进行相应的病理评分;胰腺腺泡细胞凋亡数使用TUNEL法检测;重症急性胰腺炎诱导后测量血清淀粉酶水平。结果1、与肠道微生物减少组比较,肠道微生物减少+MG1655灌胃组:（1）血清淀粉酶水平显著升高（P＜0.05）;（2）HE染色显示胰腺结构破坏较重及胰腺病理相关Schmidt标准评分较高（P＜0.05）;（3）胰腺组织中Bip、ATF6、PERK、IRE1、CHOP、Caspase12、NF-κB、TNF-α蛋白表达增加（P＜0.05）;（4）TUNEL染色显示,胰腺细胞凋亡数增加（P＜0.05）。2、肠道微生物正常组与肠道微生物减少组比较,在血清淀粉酶、胰腺损伤、内质网应激及其相关IRE1/NF-κB炎症通路及PERK/CHOP/Caspase12凋亡信号通路方面,结果差异有统计学意义;3、肠道微生物正常组与空白对照组比较,以上结果差异有统计学意义。结论1、共生大肠杆菌在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织损伤加重中发挥作用。2、共生大肠杆菌激活胰腺内质网应激相关IRE1/NF-κB信号通路加重胰腺组织炎症、激活胰腺内质网应激相关PERK/CHOP/Caspase12信号通路加重胰腺组织凋亡,从而加重重症急性胰腺炎。
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