红芪中一种杂多糖HPS3aS和一种阿拉伯半乳聚糖糖蛋白HPS3d的结构鉴定及红芪多糖3抗肿瘤活性

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红芪为豆科植物多序岩黄芪Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz的干燥根。本文对红芪干燥根中采用水提分步醇沉得到的红芪多糖3(HPS3)进行研究,HPS3经除蛋白脱色素,阴离子DE-52交换柱色谱分离纯化得到均一组分阿拉伯半乳聚糖糖蛋白(HPS3d),凝胶Sephadex G-200柱色谱进一步分离纯化得到均一杂多糖组分(HPS3aS);元素分析显示HPS3aS与HPS3d均含有少量的硫,质量分数分别为4.73%,5.57%;HPS3d中含有糖醛酸13.30%,蛋白质3.40%;高效凝胶色谱法和空间排阻色谱-多角度激光散射联用法测得两者分子量分别为1.22 X 104 Da和8.46 X 104 Da,HPS3aS在0.1MNaN03中呈球形构象,而HPS3d呈现高度支链化;薄层色谱法和气相色谱法分析HPS3aS与HPS3d的单糖组成,结果表明HPS3aS为由葡萄糖与半乳糖构成的杂多糖,而HPS3d则由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖和半乳糖醛酸多种单糖组成。部分酸水解、甲基化结合气-质联用、红外光谱、核磁共振波谱等技术研究了两者的结构,结果显示HPS3aS是由α-D-(1→4)吡喃葡萄糖构成主链,分支于0-6,支链由β-D-(1→4)吡喃半乳糖及末端吡喃葡萄糖构成,每隔12个糖残基有一硫酸基,硫酸基可能位于半乳糖残基的0-6位;而HPS3d则由β-D-(1→4)吡喃半乳糖与β-D-(1→4)吡喃半乳糖醛酸构成主链,分支位于半乳糖残基的0-6位,支链中含有α-L-(1→2)吡喃鼠李糖,α-D-(1 →)吡喃葡萄糖,α-L-(1→3)呋喃阿拉伯糖,α-L-(1 →5)呋喃阿拉伯糖及α-L-(1→3,5)呋喃阿拉伯糖,硫酸基可能位于半乳糖残基的0-6位。氨基酸分析发现,HPS3d中含有19种氨基酸,其中,胱氨酸、谷氨酸、羟脯氨酸含量较高,β-消除反应证实HPS3d含有0-型糖肽键。对红芪多糖3中4个组分(HPS3a,HPS3b,HPS3c,HPS3d)采用MTT法进行抗肿瘤实验考察,结果表明4个组分在体外抗胃癌MKN45细胞活性均较为明显,并且均呈现剂量效应关系,其中,相同剂量下,HPS3b的抗肿瘤活性最强。因此,红芪多糖3有望开发成一种抗癌药。
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