脱细胞鱼皮的性能评估和对大鼠全厚层皮肤缺损的修复作用研究

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研究目的:全厚层皮肤缺损临床治疗困难,常用的敷料凡士林纱布治疗效果存在不足。脱细胞基质是一种具有广阔前景的促创面愈合生物材料,其中脱细胞牛皮和猪皮已被证明具有良好的促进创面愈合作用,但因为宗教因素的限制和人畜共患病传播的风险,在临床应用中存在缺陷。脱细胞鱼皮(AFS)作为一种新型脱细胞材料,无上述两点缺陷,本研究目的为评估脱细胞鱼皮作为创面敷料的性能,探讨其对全厚层皮肤缺损创面愈合的影响。研究方法:通过扫描电子显微镜观察并记录AFS的微观结构;通过记录浸润PBS溶液后AFS的重量变化,计算材料吸水率;通过测量材料接触角判断其亲水性。使用CCK-8试验测试脱细胞鱼皮样品浸提液对L929成纤维细胞的细胞毒性;以SD大鼠建立全厚层皮肤缺损模型,创面覆盖AFS和对照组进行动物试验,每1~2天对创面的大小和状态进行一次观察和记录。定期对创面皮肤组织取材后固定、包埋并切片,进行HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色,并使用Image J进行分析。研究结果:扫描电子显微镜分析结果表明AFS具有分层的多孔结构,与人类皮肤组织结构近似。吸水率试验结果显示脱细胞鱼皮的吸水率逐渐升高,在第6天左右达到稳定,吸水膨胀率为(420.76±22.38)×100%。接触角试验结果可见液滴滴落样品表明后接触角程锐角,并在12s内被快速吸收消失。离子通透性测试结果显示溶液电导率在48h时达到峰值(9.53±0.12)×100%m S/cm。此外,CCK-8试验表明AFS的浸提液与对照组相比,第1天、第3天和第7天的吸光度均无显著性差异(p>0.05)。动物实验结果表明AFS组创面在第4天、第9天创面愈合速度明显快于凡士林纱布组(p<0.05),第14天创面已基本愈合。HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色结果表明AFS组大鼠创面的新生组织胶原沉积显著增加,表明材料可促进创面胶原沉积;IL-1β和IL-6免疫组织化学染色显示AFS组相比凡士林纱布组的阳性率在各个时间点都显著较低(p<0.05),AFS组FGF2的表达水平在第3天和第7天高于对照组和SURCHI-fibre组,VEGF表达量在第3天和第7天的表达皆显著高于凡士林纱布组(p<0.05)。研究结论:脱细胞鱼皮具有疏松多孔的分层结构,吸水性、亲水性和离子通透性良好,无明显细胞毒性,可促进大鼠全厚层皮肤缺损创面快速愈合,促进创面新生组织胶原沉积、血管生成,抑制早期炎症反应。脱细胞鱼皮作为一种新型创面愈合敷料,有着巨大的临床应用潜力。
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