【摘 要】
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为了解决细菌感染等问题,抗生素应运而生。但是随着抗生素的滥用,导致细菌产生了耐药性,甚至出现了超级耐药菌。由于纳米银具有出色的抗菌能力,并且纳米银不易使细菌对其产生耐药性,因此成为抗菌剂的研究热点。本研究通过化学方法将银离子还原为纳米银,证明低浓度的纳米银能够完全杀灭细菌,并且以纳米银作为唯一光敏剂在蓝光的协同作用下,使纳米银产生大量活性氧,降低了纳米银完全灭菌所需的浓度。本实验主要研究结果如下:
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为了解决细菌感染等问题,抗生素应运而生。但是随着抗生素的滥用,导致细菌产生了耐药性,甚至出现了超级耐药菌。由于纳米银具有出色的抗菌能力,并且纳米银不易使细菌对其产生耐药性,因此成为抗菌剂的研究热点。本研究通过化学方法将银离子还原为纳米银,证明低浓度的纳米银能够完全杀灭细菌,并且以纳米银作为唯一光敏剂在蓝光的协同作用下,使纳米银产生大量活性氧,降低了纳米银完全灭菌所需的浓度。本实验主要研究结果如下:（1）纳米银FNP-Ag NC抗菌药物的制备以及表征结果分析。本研究是以硼氢化钠作为还原剂;牛血清白蛋白、单宁酸作为络合剂构建的纳米银。通过紫外分光光度计、透射电镜、动态光散射以及傅里叶红外光谱对所制备的纳米银进行表征,紫外分光光度计测得纳米银的最大特征吸收峰为390 nm左右,证明了纳米银的存在;透射电镜结果显示了纳米银是直径为50±7 nm的球状颗粒;纳米银的流体力学直径为135±2 nm,PDI＜0.3表明纳米银具有良好的分散性;傅里叶红外光谱结果证明了牛血清白蛋白与单宁酸的官能团之间发生了反应,含有纳米银的样本均在1403 cm-1处出现吸收峰。（2）使用72千焦（k J）蓝光LED灯照射合成好的FNP-Ag NC,得到B-FNP-Ag NC溶液,通过检测光照前后的FNP-Ag NC纳米银活性氧含量,证明了光照后的纳米银活性氧含量由28621.27±2350.06增加到113319.17±2464.33。对FNP-Ag NC和B-FNP-Ag NC溶液进行涂平板和抑制生物膜实验,涂平板实验结果表明FNP-Ag NC的最小抑菌浓度为3μg/m L,B-FNP-Ag NC的最小抑菌浓度为1μg/m L,抑制生物膜实验结果表明FNP-Ag NC在3μg/m L的浓度下完全抑制了生物膜的产生,B-FNP-Ag NC在1μg/m L的浓度下完全抑制了生物膜的产生。通过对比分析,我们发现蓝光照射后的纳米银溶液表现出更高的抗菌性能,且降低了FNP-Ag NC的最小抑菌浓度。对所合成的纳米银进行细胞毒性实验,48小时的FNP-Ag NC处理组的细胞活性为90.82%,B-FNP-Ag NC处理组的细胞活性为92.00%,表示FNP-Ag NC和B-FNP-Ag NC对细胞没有明显的毒性。（3）为了验证含量为3μg/m L的FNP-Ag NC以及1μg/m L的B-FNP-Ag NC的纳米银药膏在此低浓度下能否达到促进伤口愈合的目的,本研究通过建立烫伤伤口模型对不同给药组伤口处愈合情况进行分析,结果表明FNP-Ag NC和B-FNP-Ag NC处理组均在15天内基本愈合,对照组未完全愈合;采集第11天不同给药组伤口处的细菌,并在琼脂平板上培养,观察到FNP-Ag NC和B-FNP-Ag NC实验组没有细菌生长,对照组有细菌生长,表明实验组达到了抗细菌感染的目的;切取不同给药组创面组织进行染色观察,对照组愈合效果较差,而FNP-Ag NC和B-FNP-Ag NC组在第15天都表现出表皮结构完整、真皮表皮附着、胶原纤维、新生微血管和表皮再生等情况。综上所述,本研究制备的纳米银FNP-Ag NC在抗菌实验中表现出出色的抗菌活性,而使用蓝光LED灯照射得到含有大量活性氧的B-FNP-Ag NC纳米银,进一步降低纳米银的杀菌浓度,提高了纳米银的抗菌效果,本研究制备的两种纳米银对细胞的毒性极低,并且以最小杀菌浓度制备的纳米银药膏达到了促进伤口愈合的目的。
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