血管紧张素转换酶的分离提取及其在降血压肽研究中的应用

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该文通过差速离心、脱氧胆酸钠增溶、DEAE-Sepharose Fast Flow从兔肺中分离提取出检测降血压肽的工具酶-血管紧张素转换酶(ACE),其比活力增加了15.7倍,达到了1.95U/mg.对提取的兔肺血管紧张素转换酶的特性研究表明:其最适反应温度和pH值分别为37℃和8.3.所提取的ACE可直接用于检测降血压肽.对降血压肽的活性检测方法进行了深入的研究,建立了反相高效液相检测其活性的方法.通过与传统检测方法比较,发现该方法准确度高,检测耗时较短,能准确地反映降血压肽的活性,克服了传统方法的缺陷,可适用于降血压肽的快速筛选.最后采用11种不同的蛋白酶对3种食物蛋白质进行水解,然后对IC<,50>小于0.1mg/ml的酶解液用自制的ACE保温后测其IC<,50>,并与其未保温的IC<,50>进行比较,从而确定了酪蛋白、碱性蛋白酶Alcalase分别作为原料和水解酶.在此基础上,确定了碱性蛋白酶Alcalase水解酪蛋白的水解度为13.8﹪,IC<,50>最小,其值为0.07mg/ml.并经液质联用分析确定,水解度为13.8﹪的酶解产物经保温后含有降血压肽IPP.
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