【摘 要】
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目的:本实验旨在探讨由外源性重组人转化生长因子-β1(rh TGF-β1)诱导的Apo E-/-小鼠脾脏组织中调节性T细胞(Tregs)与小鼠系统性炎症反应的相关性,探讨小鼠外周Tregs对颈动
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目的:本实验旨在探讨由外源性重组人转化生长因子-β1(rh TGF-β1)诱导的Apo E-/-小鼠脾脏组织中调节性T细胞(Tregs)与小鼠系统性炎症反应的相关性,探讨小鼠外周Tregs对颈动脉斑块中炎症反应的抑制影响以及对斑块稳定性的作用研究。方法:本实验采用C57BL/6品系小鼠动物作为研究对象,随机选取40只6~8周龄Apo E-/-小鼠,均分4组;单纯高脂饮食组(HF组)、高脂饮食+颈总动脉串联结扎组(TS组)、高脂饮食+颈总动脉串联结扎+TGF-β1组(TGF-β1组)、高脂饮食+颈总动脉串联结扎+生理盐水组(NS组);四组小鼠高脂喂养6周后行右侧颈总动脉串联结扎,构造颈动脉狭窄模型,继续高脂喂养5周后,HF组和TS组小鼠麻醉后分别留取颈动脉组织,TGF-β1组和NS组进行药物干预;TGF-β1组注射rh TGF-β1,NS组注射生理盐水。连续干预2周后称重行安乐死,分别留取血清、脾脏组织和右侧颈总动脉组织。采用ELISA法及氧化酶法检测白细胞介素-10(IL-10)及血清脂质含量;采用流式细胞术检测脾脏组织中Tregs的比例;采用HE染色检测斑块病理形态;采用免疫组化染色检测斑块中相关因子的表达。使用SPSS23.0进行数据统计分析,计量数据以平均数±标准误差(`x±s`x)表示,组间比较采用t-test分析,重复测量数据采用重复测量数据方差分析方法。以P<0.05为差异具有统计学意义。结果:(1)TS组小鼠右侧颈总动脉斑块形成伴管腔狭窄而HF组小鼠动脉未见明显斑块形成(成模率80%vs 0),结果表明该方法构建的颈动脉狭窄模型可行。(2)与NS组相比,TGF-β1组颈动脉斑块脂质核心较小、泡沫细胞浸润不明显及纤维帽呈连续性;Tregs比例、血清IL-10浓度显著升高(P=0.001、P=0.039);斑块中含Ⅰ型血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS4)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)蛋白表达明显减少。(3)血清总胆固醇(TC)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)两者血清浓度组间差异无统计学意义(P=0.058、P=0.114)。结论:通过给予外源性rh TGF-β1诱导的脾脏组织中Tregs调控颈动脉斑块模型Apo E-/-小鼠的系统性炎症反应,同时对颈动脉斑块的稳定性具有积极作用。
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