【摘 要】
：
目的:牙周炎是一种全球性的慢性疾病,近年研究表明许多内质网应激（Endoplasmic Reticulum stress,ERS）相关因子牙周炎中表达上调。本研究旨在探究人牙周膜细胞（Human periodontal ligament cells,hPDLCs）在ERS模型中的生存和增殖变化,研究ERS对hPDLCs起到的相关影响;通过构建过表达X盒结合蛋白1剪接变体（Spliced form
论文部分内容阅读
目的:牙周炎是一种全球性的慢性疾病,近年研究表明许多内质网应激（Endoplasmic Reticulum stress,ERS）相关因子牙周炎中表达上调。本研究旨在探究人牙周膜细胞（Human periodontal ligament cells,hPDLCs）在ERS模型中的生存和增殖变化,研究ERS对hPDLCs起到的相关影响;通过构建过表达X盒结合蛋白1剪接变体（Spliced form of X-box binding protein1,XBP1s）重组质粒,慢病毒介导感染hPDLCs,来研究调控内ERS相关基因XBP1s对牙周膜细胞的增殖及成骨能力的影响。方法:体外培养hPDLCs并设置空白组（Minimum Essential Medium Alpha,MEM-α）、对照组（Dimethyl sulfoxide,DMSO）及实验组（Tunicamycin,TM）,实验组诱导hPDLCs发生ERS并利用CCK-8及Western Blot检测细胞增殖活性及ERS通路相关蛋白表达;构建过表达XBP1s慢病毒重组质粒（pLVX-XBP1s）,包装病毒感染hPDLCs,利用间接免疫荧光、Western Blot检测凋亡及自噬相关蛋白表达;β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;CCK-8检测细胞增殖变化;RT-q PCR检测成骨基因m RNA表达量,感染BMP-2慢病毒上清后检测XBP1s与BMP-2的相互作用。结果:hPDLCs在TM诱导发生ERS 0-24h之间增殖活跃,但在24h后其增殖减缓;成功构建过表达XBP1s牙周膜细胞系（pLVX-XBP1s-hPDLCs）,XBP1s可显著诱导细胞增殖（P＜0.05）;XBP1s过表达后,诱导LC3II/LC3I比值升高,P62表达降低（P＜0.05）,同时,Caspase3表达减少而Bcl-2表达量增加（P＜0.05）;同时在传代培养后衰老的细胞数量更少;pLVX-XBP1s组（实验组）能够引起成骨基因Runx2、COL I、ALP、BSP及OC的m RNA转录增加,在与BMP-2上清共感染PDCLs后成骨基因Runx2、COL I、OC及OPN的m RNA表达继续上调（P＜0.05）。结论:XBP1s可以通过调控自噬抑制凋亡的方式对牙周膜细胞的增殖起到正向作用,同时XBP1s对hPDLCs的成骨有显著促进作用,在后续ERS通路的研究中,将成为调控凋亡的靶点,这对于有关牙周组织再生、功能化的深入研究提供了一个新的研究思路,并奠定了一定的基础。
其他文献
目的:铁离子参与了细胞中的多种代谢途径,铁离子的稳态对细胞的正常生命活动至关重要。本论文旨在通过研究铁过载对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响并分析胃癌患者细胞中铁代谢模式的改变探讨铁与胃癌转移的相关性及其关键机制,并通过构建胃癌患者铁过载相关预后模型以期对胃癌患者的预后和治疗提供有益的指导。方法:MTT法检测铁过载对人胃癌细胞HGC-27、BGC-823、MGC-803细胞增殖能力的影响。细胞划
随着我国人口增长以及铁路运输压力的不断增大,动车组安全、经济的运营成为备受关注的焦点之一。列控车载系统是动车组列车安全运营至关重要的系统,若其发生故障,势必影响列车的正常运行,对乘客安全带来严重的威胁,造成不可预料的生命财产损失。因此,对列控车载系统进行可靠性分析,准确预判可靠度的变化规律,找出影响系统失效的薄弱环节,可为维修策略的完善提供依据,从而提高设备的可靠性和列车运行的安全性。CTCS-3
作为工业自动化的重要装备,码垛机器人广泛应用于物资的搬运、装卸。近年来,随着工业自动化的不断进展,人们对码垛机器人的需求也日益增加,在实现自动导航、避障等,同时在低功耗、高效率、高精度等方面也给出了更多的需求。所以,开展码垛机器人系统的深入研究对提升码垛机器人的设计水准有很关键的意义。首先,对码垛机器人的几种方案进行对比分析,得到最终的控制方案,包括机器人本体、控制系统以及机器视觉系统,并据此仿真
随着高速铁路网的迅速发展,列车运行里程不断增加,运行时速不断提高,对高速列车在复杂环境下的安全运行提出了更高要求。目前,我国大部分列车线路位于山川和高原等偏远地区,而且运行环境监测目标种类繁多、需求量大,使用现有的传统有线监测网络对高速列车运行环境监测时,会存在网络建设成本高、网络节点部署复杂、后期维护难度大等问题。无线传感器网络（Wireless Sensor Network,WSN）技术的成熟
地表太阳辐照度是塔式光热电站稳定运行的关键影响因素。电站镜场云层遮挡会影响地表辐照度数值,带来发电效率与设备安全之间的矛盾问题。目前,国内外对于云层监测已经形成了一套自有的检测方案,但仍存在精确度较低,云层分区处理难等困境。因此本文提出一种基于图像处理技术的研究方法,可提高云层监测的识别精度并预测云层运动走向与速度。本文基于图像处理技术,对青海中控德令哈50MW光热电站镜场上空真实图像进行处理,提
目的:牙周膜细胞（PDLCs）在牙周疾病的创面愈合和组织再生中起着至关重要的作用。缺氧是牙周疾病重要影响因素,也是高原牙周病的病因之一。在炎症性牙周袋内,缺氧环境会加重牙周炎症,同时PDLCs对炎症的反应也可能发生变化。消退素D1（Rv D1）是一种内源性脂质介质,可影响牙周及口腔相关细胞的细胞内炎症通路的表达,并促进牙周再生。但是目前还不清楚缺氧和Rv D1如何影响脂多糖（LPS）刺激的PDLC
目的:本研究拟采用CRISPR/Cas9基因治疗和微针（MN）贴片相结合的方法,制备基底具有良好导电性能、尖端可溶且载有质粒的双层电转MN,并对其进行表征;然后对人舌鳞癌荷瘤免疫缺陷动物模型进行在体基因的电转染实验,实现PLK1基因的靶向敲除,通过宏观观察、组织化学、免疫组织化学、分子生物学等分析方法来评价抑瘤效果,为皮下肿瘤的临床治疗提供一定的思路。方法:（1）CRISPR/Cas9表达质粒的构
目的:肿瘤、外伤等原因引起的骨缺损一直困扰着许多骨科和口腔医生,但炎症感染的因素同时也对机体存在影响。过度的急性炎症反应,和未被规范处理的急性炎症反应转变为长期慢性炎症,会刺激破骨细胞生成,损害干细胞的成骨分化功能,导致骨形成/骨吸收两者关系失衡,引起骨愈合不良。近期本课题合作者研发了一类具有手性杂环结构的化合物,具有较好的抗炎活性及较低毒性。因此本课题探索通过添加手性杂环化合物（Chiral h
随着城市化进程的加快,地下水开采、填海造陆和地下采矿等各种人类活动工程的开展,使得城市地面沉降不断加剧,极易引起城市基础设施的破坏,严重威胁城市居民的生命财产安全,制约社会经济的可持续发展。城市地面沉降预测对于城市基础设施损害的早期预警和及时采取补救措施具有重要意义,因此,构建城市地面沉降预测模型显得至关重要。现有地面沉降预测模型存在时序特征捕捉能力差和未顾及空间邻域特征等问题,本研究构建了善于捕
夜间经济指以城市空间为依托,发生在夜间以服务业为主的相关经济活动,其业态包括夜间购物、餐饮等。中国夜间经济已转变为多元化夜间消费市场,成为当前消费和服务业升级的重要方式。国外学者对夜间经济的研究多集中在城市安全等隐性的影响因素,国内学者以夜间经济理论和政策层面研究为主,或采用传统的市场调研等方法定量研究单个功能区夜间经济时空分布,缺乏运用模型与数理统计方法进行深度挖掘,很少利用多源数据从多个角度直