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仙客来(Cyclamen persicum),为报春花科仙客来属球茎花卉。仙客来花姿奇特,花瓣反转,是世界著名的盆栽花卉。仙客来属共有21个种,目前市场上的品种均来源于Cyclemen persicum Mill.仙客来原产于南欧及地中海一带,抗性较差,逆境严重影响仙客来的经济价值。研究表明,提高植物体内Mn-SOD活性是增强植物抗逆性的有效途径之一。本试验通过根癌农杆菌介导法将Mn-SOD基因导入仙客来,获得转化完整植株,为选育具有高抗逆性的仙客来新品种奠定基础。主要研究结果如下:1.建立了仙客来品种“鲜红1011”高效再生体系。采用正交试验设计研究了基本培养基、TDZ和NAA等3个因素及其组合对仙客来叶片不定芽再生的影响。结果表明,TDZ浓度对叶片不定芽的诱导起主要作用,其次为基本培养基种类和NAA,仙客来叶片再生的适宜组合是1/3 MS+TDZ 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,在此培养基上,叶片再生频率达到93.1%,平均再生芽数为15.7。不同叶龄的叶片再生能力不同,试验中发现培养40d的试管苗叶片再生效率高于其它叶龄的叶片。叶片不同部分再生能力也有差异,叶基部再生效率高。不同浓度的AgNO3对仙客来叶片再生的影响不同,AgNO3质量浓度在0.1-0.6 mg/L范围内,对叶片再生几乎没影响,浓度增高,叶片再生受抑制。在无菌条件下培养仙客来种子,并以无菌萌发植株的子叶节、子叶及叶柄为外植体进行不定芽再生研究。试验结果表明,不同浓度的TDZ对外植体的诱导效果不同,TDZ 0.2 mg/L对叶柄和子叶节再生芽的诱导效果最好,叶柄最高再生频率为53.2%,再生芽数为6.7,子叶节最高再生频率为68.5%,再生芽数为8.4,其适宜再生培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L;0.5 mg/L TDZ对子叶再生芽的诱导效果最好,最高再生频率为23.6%,再生芽数为3.5,其适宜再生培养基为MS+TDZ 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。以叶片再生不定芽为材料,进行了不同激素组合对仙客来不定芽增殖和生根的研究,筛选出仙客来不定芽适宜增殖、生根培养基分别为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L和1/2 MS+IBA 1.0 mg/L。2.建立了农杆菌介导的仙客来遗传转化体系,首次获得Mn-SOD基因转化仙客来的转化植株。在建立仙客来叶片再生体系的基础上,研究了Mn-SOD基因转化中影响叶片转化效率的的多种因素,包括Kan浓度、抑菌素浓度、预培养时间、共培养时间,侵染菌液以