OsMADS29调控水稻种子萌发的功能研究

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种子的快速萌发有利于作物种子播种后的快速出土,提高种子的出苗率以及整齐度,为植株生长提供一个良好的开端。MADS29是MADS-box转录因子家族成员之一。前期研究表明,以珍汕97B为背景构建的OsMADS29近等基因系(NIL-ZS和NIL-NIP)存在种子萌发速率的差异。为探讨OsMADS29在水稻种子萌发过程中的作用,本研究以功能互补、超表达、GUS转基因株系和近等基因系为研究材料,通过考察不同材料的萌发表型,以及不同萌发时间段OsMADS29的表达情况,探究其对水稻种子萌发的调控作用。主要研究结果如下:1.OsMADS29近等基因系NIL-ZS萌发速率显著快于NIL-NIP;在40h时,NIL-ZS萌发率达到90%,而NIL-NIP萌发率为70%。2.利用构建的OsMADS29功能互补和超表达转基因材料进行种子发芽试验,结果表明,阳性转基因植株种子的萌发速率比野生型要快,证实OsMADS29是影响种子的萌发速率的关键因子。3.在NIL-ZS和NIL-NIP种子萌发进程的不同时间点检测OsMADS29的表达量,发现两者存在相同的动态表达模式。种子吸胀后,OsMADS29的表达量均呈先上升后逐渐下降的趋势,但NIL-ZS比NIL-NIP的表达峰值提前。NILZS表达量在8h达到最高,而NIL-NIP表达量在16h才达到最大值,且NIL-ZS中OsMADS29的最大表达量显著高于NIL-NIP,说明OsMADS29可能主要在表达差异上参与种子萌发调控。4.利用不同浓度的ABA处理OsMADS29超表达转基因和近等基因系种子发现,与野生型相比,超表达阳性种子对ABA不敏感,而近等基因系间NILNIP对ABA更敏感。在超表达阳性种子中,ABA代谢途径相关基因ABI2、ABI3和ABI5的表达量显著低于野生型,而在近等基因系NIL-NIP中ABI2、ABI3和ABI5的表达量要显著高于NIL-ZS。说明OsMADS29可能通过ABA途径参与调控种子萌发过程。5.种子萌发过程中,超表达阳性材料α-淀粉酶活性显著高于野生型。对α-淀粉酶基因的表达量分析结果显示,Amy1a,Amy1c,Amy3b和Amy3e在超表达阳性种子中的表达量要显著高于野生型。与此一致的是,近等基因系NIL-ZS中α-淀粉酶活性显著高于NIL-NIP,4个α-淀粉酶基因的表达量也显著高于NIL-NIP。说明OsMADS29可能通过调控α-淀粉酶的表达,提高其酶活,进而影响种子萌发。6.对转基因材料和近等基因系的农艺性状的考察表明,OsMADS29对穗重、穗长、千粒重和单株产量等产量性状也有影响。
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