食管鳞癌预后相关基因LRFN2作用与机制的初步研究

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenrongxu222
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研究目的本研究拟探讨LRFN2基因表达在食管鳞癌(Esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)预后中的价值,及其对食管鳞癌细胞生物学功能的影响和潜在的分子机制。研究方法1.回顾性临床研究收集67例ESCC患者的癌与癌旁组织及相应临床病理资料,并随访生存期;应用q PCR检测标本中LRFN2 m RNA的表达水平;分析LRFN2在癌及癌旁中的表达情况,探索其与临床病理特征的关系及对生存预后的影响。2.细胞分子学研究构建过表达质粒载体(p3*Flag-CMV-14-LRFN2)以上调食管鳞癌细胞EC9706中LRFN2基因的表达,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell法检测细胞侵袭和迁移的能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blot法检测凋亡相关蛋白表达,NMDA受体激动剂(NMDA)及抑制剂(Ifenprodil及MK-801)处理过表达LRFN2细胞后检测各组的细胞增殖水平。研究结果1.回顾性临床研究结果LRFN2 m RNA在食管鳞癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(15例vs.52例,P<0.001);LRFN2表达与食管鳞癌患者的TNM分期相关(P=0.008);且LRFN2高表达组患者的中位总生存期显著优于低表达组(47.15 vs.23.7月,P<0.001)。2.细胞分子学研究结果与对照组相比,过表达LFRN2可显著抑制EC9706细胞增殖、侵袭及迁移能力,并诱导细胞的凋亡;同时,抗凋亡蛋白BCL-2、BCL-XL、PARP表达水平显著下降,而促凋亡蛋白BAX及caspase 3蛋白的水平显著上调。在LRFN2过表达的细胞中,NMDA可进一步抑制细胞的增殖能力,而Ifenprodil和MK-801可逆转LRFN2过表达对细胞增殖的抑制作用。研究结论1.LRFN2的表达水平可作为预测食管鳞癌预后的分子标志物;2.LRFN2基因可能通过影响NMDA受体通路抑制食管鳞癌细胞的生物学功能。
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