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[目 的]探究hsa_circ_0084606在肝细胞癌中的表达水平及其临床意义;初步研究敲低hsa_circ_0084606的表达水平对肝细胞癌细胞生长增殖、DNA合成能力、克隆形成能力、细胞迁移能力和细胞周期等生物学功能的影响。[方法]1.首先设计环状RNA特异性扩增引物,利用实时定量PCR检测hsa_circ_0084606在45对肝细胞癌及其配对的癌旁组织样本中的表达水平,以2-ΔΔCt法计算基因表达量,用GraphPad Prism8软件画图;利用配对t检验统计分析hsa_circ_0084606在临床样本的表达差异是否具有统计学显著性;利用卡方检验分析检测一般临床资料分析hsa_circ_0084606的表达水平与临床病理信息的关系,主要包括患者性别、年龄、吸烟史、酗酒史、ALT(丙氨酸氨基转移酶)水平、ALB(白蛋白)水平、AFP(甲胎蛋白)水平、PT(凝血酶原时间)水平、HBsAg(乙型肝炎病毒表面)是否阳性、是否合并肝硬化、肿瘤直径、肿瘤数目、是否存在微血管浸润、CNLC分期及肿瘤分化程度;利用Spearman秩相关检验分析hsa_circ_0084606的表达水平与肝细胞癌患者临床病理特征的相关性。2.利用实时定量PCR检测hsa_circ_0084606在肝细胞癌细胞株的表达水平,以2-ΔΔCt 法计算表达量,用 GraphPad Prism8 软件绘图。hsa_circ_0084606-siRNA转染至肝细胞癌细胞株HepG2以敲减hsa_circ_0084606的表达水平,并采用qRT-PCR法验证其敲减效果,进而研究敲低hsa_circ_0084606的表达之后对肝细胞癌细胞生物学功能的影响。主要包括以下几种实验:1)用cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖实验检测hsa circ 0084606对肝细胞癌细胞株生长增殖的作用;2)用EdU细胞增殖试验检测hsa_circ_0084606对肝细胞癌细胞株DNA合成能力的作用;3)用克隆形成实验检测hsa_circ_0084606对肝细胞癌细胞株克隆形成能力的作用;4)用Transwell小室实验用来检测hsa_circ_0084606对肝细胞癌细胞株迁移能力的作用;5)用流式细胞仪检测hsa_circ_0084606对肝细胞癌细胞株细胞周期的作用。[结果]1.纳入的45例肝细胞癌患者临床样本,用配对t检验统计分析环状RNA hsa_circ_0084606的表达差异,结果提示hsa_circ_0084606在肝细胞癌组织的表达量(x±s=3.6562±8.7683)高于癌旁组织的表达量(x±s=1.0069±0.1078)(P<0.05);用卡方检验检测 hsa_circ_0084606 的表达量与肝细胞癌患者一般临床资料的关系,结果提示hsa_circ_0084606的表达水平在肝细胞癌患者是否存在微血管浸润(MVI)的差异具有统计学显著性(P<0.05);用Spearman秩相关分析检测hsa_circ_0084606的表达量与肝细胞癌患者临床病理信息的相关性,结果显示hsa_circ_0084606的表达水平与肝细胞癌患者微血管浸润(MVI)呈正相关,即hsa_circ_0084606的表达水平越高,越容易发生肝细胞癌微血管浸润(P<0.05)。2.hsa_circ_0084606在肝细胞癌细胞株HepG2的表达水平相比于正常肝细胞较高(P<0.05);用siRNA转染至肝细胞癌细胞株HepG2,结果显示hsa_circ_0084606的表达水平显著降低(P<0.05);CCK-8实验结果提示,与siRNA-NC 组相比,siRNA-1、siRNA-2 和 siRNA-3 组 HepG2 细胞增殖能力显著降低(P<0.05);EdU实验结果提示,与siRNA-NC组相比,siRNA-2和siRNA-3组HepG2细胞DNA合成能力显著降低(P<0.05);平板克隆实验结果提示,与 siRNA-NC 组相比,siRNA-1、siRNA-2 和 siRNA-3 组 HepG2 细胞克隆形成能力显著降低(P<0.05);Transwell小室实验结果提示,实验组siRNA-1、siRNA-2和siRNA-3组HepG2细胞迁移能力与对照组siRNA-NC组相比,无明显统计学显著性(P>0.05);流式细胞术检测细胞周期实验结果提示,实验组siRNA-1、siRNA-2和siRNA-3组HepG2细胞周期变化与对照组siRNA-NC组相比,无明显统计学显著性(P>0.05)。[结论]环状RNAhsa_circ_0084606会促进肝细胞癌恶性生物学行为的发生,有望作为肝细胞癌诊疗的新的生物标记物。