【摘 要】
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碱性蛋白酶在洗涤、制革、食品等行业中有着广泛的用途。本论文从土壤中分离筛选到一株产碱性蛋白酶的菌株I13,对最适产酶条件进行了优化,并研究了此酶的酶学性质。研究结果
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碱性蛋白酶在洗涤、制革、食品等行业中有着广泛的用途。本论文从土壤中分离筛选到一株产碱性蛋白酶的菌株I13,对最适产酶条件进行了优化,并研究了此酶的酶学性质。研究结果如下:从土壤悬液中分离筛选到一株碱性蛋白酶的高产菌株113,该菌为革兰氏阴性菌,显微镜检菌株为直杆状。在干酪素平板上生长良好,产生乳白色、圆形、不透明的菌落,表面光滑有光泽,边缘整齐,中间隆起。对产碱性蛋白酶菌株的鉴别性培养基进行了选择,最终确定以酵母粉酪素培养基作为鉴别性培养基。通过单因素试验和响应面试验,在摇瓶培养条件下对菌株的碳源、氮源、金属离子、培养温度、接种量等产酶条件进行了优化。得到了菌株的最适发酵条件为:1.0%葡萄糖、1.0%酵母粉、0.05%氯化锰,0.1%干酪素、1.0%氯化钠,培养温度为14.7℃,起始培养pHH10.0,最佳接种量5.3%,装液量10 mL/50 mL,在此优化条件下酶活可达到321.34U/mL。发酵液离心后,上清液经(NH4)2SO4分级沉淀,得到初步纯化的酶液,并对酶学性质进行了研究。该酶的最适反应温度为40℃,最适反应的pH为10.5,具有较宽的pH谱,稳定性强。该酶具备了良好的表面活性剂与氧化剂稳定性,表面活性剂和氧化剂对酶的强激活作用成为此碱性蛋白酶最大的特点之一。
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