兰花是兰科植物的总称,是开花植物中最大的一个科,属于单子叶植物,是目前观赏花卉中价值最高的一种。兰花的花色、花期和花形的改良一直是兰花育种的难点和重点。由于兰花比较难以进行遗传转化,并且兰科植物的花有许多独有的特征,因此进行兰花转基因的研究不仅可以为兰花分子生物学研究打下良好的基础而且还有很大的商业利用价值,在基础理论研究和实际应用方面都有很重要的意义。目前在兰花转化上进展缓慢,只在9个属的兰花转化上有过报道。 本文以大花蕙兰为材料,应用农杆菌介导的遗传转化方法进行了遗传转化研究。为了改变兰花的花期,我们利用拟南芥中克隆的花分生组织特性基因AP1构建了植物表达载体pCAMBIA1305-2x35S-AP1-nos,先转化烟草进行功能验证。转基因烟草提前了30天开花,证明花分生组织特征基因AP1的异源表达也可以加快花发育进程,具有促进植物提早开花的作用。随后,试图AP1基因转入大花蕙兰,在高效稳定的大花蕙兰再生体系的基础上,开展了较为全面的兰花转基因研究。将从农杆菌菌液浓度、预培养条件、诱导剂浓度、共培养时间等几个方面进行探讨影响转化效率的因素。虽然都目前为止,暂时还没有得到转化成功的GUS活性检测为阳性的转基因PLB,但是,随着大花蕙兰的遗传转化体系优化的研究,利用基因工程技术导入AP1基因改变现有观赏性较高的兰花花期的前景可观,而本试验也能为更多学者进一步采用分子育种培育更早花期的兰花新品种提供帮助及经验。