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【目的】鼻咽癌在中国南方发病率极高，尤其是广东省，发病率较欧美等其他地区高25至30倍。鼻咽癌发生部位的隐匿性和早期临床表现的不明显性使得其早期诊断相对困难。而且，鼻咽癌具有高度侵袭性和转移性，一旦发生转移，患者愈后较差。目前作为鼻咽癌主要治疗手段的放疗亦面临着肿瘤的辐射抗性和组织的严重损伤性两大难以解决的问题。所以，探讨鼻咽癌肿瘤发生、发展的相关机制至关重要。早日找到鼻咽癌特异性的标志物来指导临床进行早期诊断、治疗及预后评估，也必将带来重大的社会效益和经济效益。GALNT7是多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶(polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase, ppGalNAc-T)家族中的成员,是催化O-聚糖合成第一步的酶,O-糖基化与细胞识别、肿瘤细胞生长、转移和粘附等功能密切相关。本实验室前期工作利用QPCR的技术验证了GALNT7在鼻咽癌组织和细胞中是低表达的，且其表达与miR-494的表达是负相关的。在此，我们旨在以鼻咽癌为研究对象，采用RNAi沉默GALNT7的方法研究GALNT7在鼻咽癌发生、发展中的生理功能，为鼻咽癌早期诊断、治疗，研制新的基因靶向药物提供重要的实验线索和依据。 【方法】我们用qRT-PCR检测miR-494和GALNT7在30例鼻咽癌组织和20例鼻咽正常组织的表达量，双荧光素酶报告载体实验用来验证GALNT7为miR-494的作用靶点，并且用qRT-PCR和western blot实验分别在mRNA水平和蛋白水平验证了GALNT7为miR-494的作用靶点。MTT和克隆形成实验用来检测GALNT7对鼻咽癌细胞增殖的影响；Transwell和划痕实验用来验证GALNT7对鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响；光天蛋白酶3-酶联免疫吸附测定及Hoechst33258染色实验检测GALNT7对鼻咽癌细胞凋亡的的影响；最后用病毒稳转鼻咽癌细胞后注射到裸鼠皮下成瘤，观察miR-494及GALNT7对动物水平瘤体生长的影响。 【结果】MiR-494表达量在鼻咽癌组织较正常鼻咽组织下调，GALNT7的表达水平与miR-494的表达水平在鼻咽癌细胞中呈负相关。构建荧光素酶报告载体后与miR-494 mimic共转染，与对照组相比，鼻咽癌细胞6-10B、9-4E和CNE2细胞中荧光素酶的活性被敲低(GALNT7，p=0.030，p<0.001，p=0.026)；共转染miR-494 inhibitor，鼻咽癌细胞中GALNT7活性无明显改变；构建的相应的突变体后再与miR-494 mimic、miR-494 inhibitor分别共转染后发现其活性与对照组相比也未见明显差异。QRT-PCR显示miR-494过表达后GALNT7在mRNA水平下降。Western blot实验证实miR-494 mimic明显下调GALNT7的蛋白水平表达， miR-494 inhibitor对GALNT7蛋白水平表达的影响未见明显差异。 MTT检测显示与对照组相比，GALNT7-siRNA对鼻咽癌细胞 CNE2、6-10B和9-4E在24h，48h和72h时的增殖抑制率分别为23.37％(24 h),17.76%(48 h),和24.86%(72 h)(p=0.015);14.28%(24 h),22.77%(48 h),和1.44%(72 h)(p=0.002);21.38%(24 h),20.58%(48 h),和41.84%(72 h)(p=0.003)。克隆形成实验中，GALNT7-siRNA使得和CNE2、6-10B和9-4E三株鼻咽癌细胞克隆云集块少且小，抑制率分别为75.4%,61.7%,46.9%（p<0.05） Transwell迁移实验显示，GALNT7-siRNA对鼻咽癌细胞CNE2、6-10B和9-4E在48h后迁移抑制率分别为52.57%(p=0.008),46.95%(p=0.017),和62.5%(p=0.003)。划痕实验证实 GALNT7-siRNA对鼻咽癌细胞 CNE2、6-10B和9-4E在48h后迁移抑制率分别为41.45%(p=0.029),59.34%(p=0.002),和66.66%(p=0.013)。Transwell侵袭实验发现与对照组相比，转染了 GALNT7-siRNA的鼻咽癌细胞CNE2、6-10B和9-4E中细胞侵袭的数量分别减少37.85%(p=0.032),47.48%(p=0.049),和51.91%(p<0.001)。 光天蛋白酶3-酶联免疫吸附测定实验显示转染GALNT7-siRNA的鼻咽癌细胞与对照组细胞的光天蛋白酶3活性相比明显升高（cne2,9-4e,6-10b,p<0.05）。Hoechst33258染色实验同样也显示相同结果，转染GALNT7-siRNA的鼻咽癌细胞与对照组细胞相比在镜下被染色的凋亡细胞明显增多（p<0.05）。 裸鼠体内成瘤实验显示转染GALNT7-siRNA的鼻咽癌细胞所成瘤体较转染无意链鼻咽癌细胞所成的瘤体更小，重量较轻。GALNT7-siRNA组及miR-494 MIMIC组较各自对照组显著抑制肿瘤的生长，GALNT7-siRNA组最终瘤体大小在CNE2、9-4E、6-10B分别为（809.56±179.53 mm3,749.77±143.1 mm3,518.88±85.52 mm3。siRNA对照组最终瘤体大小在CNE2、9-4E、6-10B分别为（1165.86±340.55 mm3,966.47±226.78 mm3,680.01±138.86 mm3），较对照组明显减小(p=0.008, p=0.048, and p=0.035)。miR-494 MIMIC组最终瘤体大小在CNE2、9-4E、6-10B分别为652.32±119.82 mm3,608.32±121.84mm3、530.54±104.28 mm3, MIMIC对照组最终瘤体大小在CNE2、9-4E、6-10B分别为887.27±270.4 mm3,861.91±186.33 mm3,666.59±95.44 mm3，较对照组明显减小(p=0.048,p=0.004,p=0.018)，同样这两组的最终瘤体重量也较各自对照组为轻（p<0.05）。然而转染了miR-494 inhibitor的鼻咽癌细胞较其对照组的成瘤作用却更加明显，miR-494 inhibitor组最终瘤体大小在CNE2、9-4E、6-10B分别为1098.27±427.75 mm3,726.44±187.97 mm3,717.4±149.43 mm3, inhibitor对照组最终瘤体大小在CNE2、9-4E、6-10B分别为834.36±413.28 mm3,542.03±166.43 mm3,549.4±98.03 mm3，miR-494 inhibitor组较其对照组所成肿瘤明显更大(p=0.177, p=0.038, and p=0.019),同样miR-494 inhibitor组的最终瘤体重量也较其对照组更重（p<0.05）。 【结论】GALNT7的表达量在鼻咽癌组织较鼻咽正常组织上调，MiR-494表达量在鼻咽癌组织较正常鼻咽组织下调，GALNT7的表达水平与miR-494的表达水平在鼻咽癌细胞中呈负相关，GALNT7被证实为miR-494的直接作用靶点。敲低GALNT7的表达可抑制鼻咽癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭，促进细胞的凋亡；动物成瘤实验证实GALNT7-siRNA和miR-494抑制鼻咽癌细胞在动物体内生长，与其体外抑制鼻咽癌细胞生长和侵袭的结果一致。