JPYQ现代方药和Euparin抗抑郁作用及其机制的研究

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背景抑郁症(Depression)是一种发病率和致残率高的精神性疾病,严重威胁着人类的健康和生命安全。本课题初步研究发现,健脾益气(Jianpi Yiqi,JPYQ)现代方药可改善动物的抑郁样行为,但关于其进一步的抗抑郁作用及其机制尚未研究。Euparin(2-异丙烯基-5-乙酰基-6-羟基苯并呋喃,泽兰素)是从窄头橐吾根部提取出的苯并呋喃类化合物,具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等活性;前期研究发现,Euparin可改善小鼠大脑皮质损伤导致的记忆障碍,因此Euparin是否具有抗抑郁作用及其作用机制,有待进一步研究。目的探讨JPYQ现代方药和Euparin的抗抑郁作用;探究JPYQ现代方药对抑郁模型小鼠皮层、海马、胃及胰腺组织中免疫球蛋白超家族11(Immunoglobulin superfamily,member11,Igsf11)、蛋白质二硫键异构酶2(Protein disulfide isomerase associated 2,Pdia2)、生育酚结合蛋白(SEC14-like 2,Sec14l2)以及Euparin对抑郁模型小鼠皮层、海马组织中精脒/精胺N1-乙酰基转移酶1(Spermidine/Spermine N1-Acetyltransferase 1,SAT1)、脑源性神经营养因子(brain derived neurophic factor,BDNF)、N-甲基-D-门冬氨酸受体2B亚基(N-methyl-D-aspartate receptor type 2B,NMDAR2B)m RNA和蛋白的表达影响。方法建立慢性不可预知性温和应激抑郁小鼠模型,分为对照组、模型组、氟西汀阳性对照组、JPYQ现代方药低、中、高剂量组(8mg/kg、16mg/kg、32mg/kg)及Euparin低、中、高剂量组(8mg/kg、16mg/kg、32mg/kg)。正常对照组与模型组给予同等体积的生理盐水,阳性对照组给予氟西汀(按30mg/kg剂量给药),JPYQ现代方药和Euparin各剂量组分别给予相应药物的相应剂量。均采用灌胃给药,每天2次,连续给药2周。通过体重、旷场实验、糖水消耗实验等测定小鼠的行为学指标;采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,q PCR)和Western blot技术分别检测各组小鼠皮层、海马、胃及胰腺组织中Igsf11、Pdia2、Sec14l2 m RNA及蛋白的表达变化,检测各组小鼠皮层、海马组织中SAT1、BDNF、NMDAR2B m RNA及蛋白的表达变化。结果(1)与对照组比较,模型组小鼠体重、水平移动格数、直立次数以及糖水偏好指数明显下降(P﹤0.05或P﹤0.01),且各组织中Igsf11、Pdia2和Sec14l2 mRNA和蛋白的表达量升高,SAT1、BDNF和NMDAR2B m RNA和蛋白的表达量下降,说明抑郁模型建造成功。(2)JPYQ现代方药和Euparin均可改善小鼠抑郁样行为,与模型组比较有显著性差异(P﹤0.05或P﹤0.01)。(3)低、高剂量的JPYQ现代方药明显降低抑郁小鼠Igsf11、Pdia2和Sec14l2m RNA及蛋白的表达量,改善小鼠抑郁情况,与模型组比较有显著性差异(P﹤0.05)。(4)高剂量的Euparin可升高抑郁小鼠脑内SAT1、BDNF和NMDAR2B的表达量,与模型组比较存在显著性差异,其药效与氟西汀阳性组相当(P﹥0.05)。结论JPYQ现代方药和Euparin均可有效改善小鼠的抑郁行为,其机制可能是分别通过下调Igsf11、Pdia2、Sec14l2和上调SAT1、BDNF、NMDAR2B的表达。
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