【摘 要】
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目的 通过研究桂枝茯苓丸含药培养液对子宫内膜癌Ishikawa细胞的抗肿瘤影响,探讨桂枝茯苓丸对非编码RNAH19的作用,为其治疗子宫内膜癌提供良好的理论依据。方法 1.在子宫内膜癌HEC-1A、HEC-1B和Ishikawa细胞中,利用实时荧光定量PCR检测lncRNA H19的表达量,探索lncRNA H19与子宫内膜癌的关系。在Ishikawa细胞中利用lncRNAH19 shRNA敲低ln
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目的 通过研究桂枝茯苓丸含药培养液对子宫内膜癌Ishikawa细胞的抗肿瘤影响,探讨桂枝茯苓丸对非编码RNAH19的作用,为其治疗子宫内膜癌提供良好的理论依据。方法 1.在子宫内膜癌HEC-1A、HEC-1B和Ishikawa细胞中,利用实时荧光定量PCR检测lncRNA H19的表达量,探索lncRNA H19与子宫内膜癌的关系。在Ishikawa细胞中利用lncRNAH19 shRNA敲低lncRNAH19,通过免疫印迹技术检测自噬相关蛋白p62、Beclin-1和LC3II表达,流式细胞术实验评估细胞凋亡率,CCK8实验检测细胞增殖活力,进一步验证lncRNAH19在体外可以促进子宫内膜癌的增殖。2.在Ishikawa细胞中过表达lncRNA H19,用桂枝茯苓丸含药液培养后,应用Western blot检测Ishikawa细胞中自噬标志蛋白P62、Beclin1和LC3II的表达变化,CCK8和流式细胞术检测Ishikawa细胞增殖和凋亡的变化。验证桂枝茯苓丸可以逆转lncRNA H19治疗子宫内膜癌。结果 1.与正常子宫内膜细胞相比,lncRNA H19在子宫内膜癌HEC-1A、HEC-1B和Ishikawa细胞中高表达。在Ishikawa细胞中敲低lncRNA H19的表达后,细胞p62的表达下降,beclin-1和LC3II表达升高,促进Ishikawa细胞自噬,CCK8实验证明Ishikawa细胞的增殖能力显著降低（P＜0.05）。流式细胞术揭示敲低lncRNA H19促进细胞的凋亡（P＜0.05）。2.在Ishikawa细胞中过表达lncRNA后,与oe-NC组相比,oe-H19组的Ishikawa细胞中p62的表达上升,beclin-1和LC3II表达下降,抑制Ishikawa细胞的自噬,CCK8实验和流式细胞术表明oe-H19组的细胞增殖活性增高和细胞凋亡率下降（P＜0.05）。而经桂枝茯苓丸培养液处理后,可以逆转过表达的lncRNAH19对Ishikawa细胞的影响,诱导Ishikawa细胞自噬,促进细胞凋亡。结论 本研究发现lncRNA H19在子宫内膜癌细胞中高表达,抑制子宫内膜癌细胞的自噬和增殖。桂枝茯苓丸可以逆转lncRNAH19的表达,促进Ishikawa细胞自噬,抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖。
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