经筋松解调控MAPK信号通路治疗兔膝骨关节炎的机制研究

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目的:
  通过对经筋松解治疗兔膝骨性关节炎的动物实验研究,探索该治疗方法对MAPK信号转导通路的影响,进一步探究其作用机制。
  方法:
  分组:24只新西兰兔随机分为空白组6只和实验组18只,实验组造模45天后随机分为模型组、经筋组、电针组,每组各6只。造模:24只新西兰兔,均于实验第1、4、7天从外膝眼凹陷处进针,实验组注射入3%木瓜蛋白酶0.5ml,空白组新西兰兔注射0.9%生理盐水0.5ml,每只兔子共3次。治疗:空白组:正常饲养,不做治疗;模型组:造模后正常词养,不做任何干预;电针组:选取阳陵泉、阴陵泉、内外膝眼进行电针治疗,1次/2天,共治疗1月;经筋组:应用针刀镜对左膝关节进行灌洗松解治疗1次,1周后,行经筋刀治疗,一周1次,共治疗3次。各组兔于治疗结束后1周通过静脉空气栓塞法处死,解剖兔左膝关节,大体观察4组兔子模型左膝关节软骨和关节囊等,用荧光定量PCR检测关节软骨P38、ERK1/2、MMP13的基因表达和Western Blot检测p-P38、p-ERK1/2、MMP13、CollagenⅡ蛋白表达。采用SPSS22软件进行数据统计分析。
  结果:
  兔膝关节大体观察:空白组:左膝关节无红肿;无血管翳形成,关节面光滑透亮;关节囊无增生肥大;模型组:左膝关节红肿明显;关节软骨暗淡、无光泽,部分骨面较粗糙,缺损明显,关节囊增厚;经筋组:左膝关节稍有肿胀;软骨色泽淡白,骨面轻度磨损,关节囊轻度增厚;电针组:左膝关节稍有肿胀;软骨色泽淡白、骨面轻度磨损,较经筋组严重;关节囊轻度增厚。荧光定量PCR检测关节软骨P38、ERK1/2、MMP-13的基因表达情况:四组P38、ERK1/2组间比较,无统计学意义(P>0.05);MMP-13基因表达趋势为模型组>电针组>经筋组>空白组,经筋组与电针组及造模组比较,MMP13基因表达下降更明显,差异具有统计学意义(P<0.05);Western Blot检测p-P38、p-ERK1/2、MMP13、CollagenⅡ蛋白表达,较空白组相比,其余3组p-P38、p-ERK1/2、MMP13的蛋白表达均上调,经筋组与电针组及造模组比较,p-P38、p-ERK1/2、MMP13的蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。
  结论:
  经筋松解疗法可以减轻兔膝骨关节炎,疗效较电针好,其可能的作用机制为:通过抑制MAPK通路的磷酸化,降低MMP-13基因和蛋白的表达,导致Ⅱ型胶原蛋白的表达增加,从而有效减轻KOA关节软骨破坏,起到治疗膝骨关节炎的作用。
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