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目的（1）检测miR-320a在结直肠癌组织中表达情况，研究miR-320a在结直肠癌细胞中生物学作用，并探索其在结直肠癌发生发展中作用的分子机制。（2）验证miR-320a在结直肠癌细胞中表达调控方式。方法（1）应用实时定量PCR检测60例结直肠癌组织和五株结直肠癌细胞株中miR-320a表达情况。（2）Trans-well小室模型和CCK-8法分别检测五株结直肠癌细胞株迁移和增殖能力（3）利用慢病毒构建稳定下调miR-320a的SW620细胞株以及过表达miR-320a的SW480细胞株，CCK-8法，Trans-well小室模型和细胞流式技术评价miR-320a过表达或表达下调后结直肠癌细胞的增殖，迁移能力的变化和细胞周期改变。裸鼠成瘤模型评价miR-320a表达抑制后结直肠癌细胞裸鼠成瘤能力和对细胞外基质侵犯情况。（4）蛋白免疫印迹技术（Western blot）检测过表达和下调miR-320a后结直肠癌细胞株E-cadherin和Vimentin表达变化。免疫组织化学法评估裸鼠生成瘤中E-cadherin和Vimentin表达改变。（5）生物信息学预测miR-320a靶基因。Ras相关C3肉毒素底物1（Rac1）的3′端非翻译区（3′UTR）存在两个可能的miR-320a结合位点，成为候选基因之一。Western blot和半定量PCR证明miR-320a过表达或表达抑制后蛋白水平和mRNA水平表达变化（。6）将PCR扩增出的Rac1mRNA3′UTR片段连接入pMIR-REPORT Luciferase报告基因载体，分别针对2个可能结合位点制备出2个突变3′UTR片段，连接入空载报告基因载体以构建出相应的突变型载体pMIR/Rac1/mut661和pMIR/Rac1/mut1140，与miR-320a mimics共同瞬时转染SW620细胞后检测相对荧光素酶活性。免疫组织化学法检测小鼠成瘤切片中Rac1表达变化。（7）分别转染Rac1过表达载体和siRNA/Rac1进入相应的结直肠癌细胞株用以验证Rac1作为miR-320a多个靶蛋白之一在miR-320a调控结直肠癌细胞增殖与转移方面是否起主要作用。（8）根据TESS工具的提示，通过过表达和沉默E2A表达验证其对miR-320a的影响，然后应用ChIP实验验证E2A是否可以直接结合miR-320a基因序列。（9）通过过表达及沉默表达质粒验证E2A对结直肠癌细胞侵袭/迁移及增殖能力的影响。（10）通过慢病毒技术验证miR-320a在E2A蛋白抑制结直肠癌进程中的重要性。结果：（1）结直肠癌细胞中miR-320a的表达水平与细胞迁移和增殖能力呈负相关，且伴随转移的结直肠癌组织中miR-320a的表达较低。（2）miR-320a可以抑制结直肠癌细胞侵袭/迁移以及增殖能力。（3）miR-320a抑制结直肠癌细胞EMT行为。（4）miR-320a通过直接结合于Rac1mRNA的3′UTR区下调Rac1蛋白表达水平。（5）Rac1作为miR-320a的靶蛋白之一，在miR-320a的生物学效应中起重要作用。（6）在结直肠癌细胞中E2A可以通过直接结合miR-320a基因转录调控序列上调miR-320a的表达。（7）E2A可以抑制结直肠癌细胞侵袭/迁移，EMT行为和增殖能力，miR-320a是在E2A蛋白调控结直肠癌细胞增殖能力中起重要作用。结论：miR-320a在结直肠癌细胞中以直接结合的方式抑制Rac1表达从而抑制癌症细胞转移和增殖能力，其表达受E2A蛋白的直接调控。