白术多糖对岭南黄鸡免疫功能影响的研究

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白术多糖(Polysaccharide ofAtractylis macroceohala koidz,PAM)是白术发挥药理作用的重要活性成分,具有促生长、增强机体免疫功能等作用,其无毒、无残留、生物活性高等特点,成为近年来绿色饲料添加剂开发的重要方向。本研究通过体内及体外试验探讨PAM对黄鸡幼雏免疫功能的调节作用,体内试验选用150只岭南黄鸡幼雏,随机分为5组,饲粮中分别添加0、100、200、400和600mg·kg-1的PAM进行饲喂,于14、21、28、35日龄检测免疫器官发育状态及细胞因子mRNA的表达量。体外试验选用28日龄雏鸡分离脾脏淋巴细胞,在培养液中分别添加100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.57、0.78mg·L-1的PAM培养鸡脾淋巴细胞,MTS法检测淋巴细胞增殖率,选择PAM的最适添加浓度,分别在37℃和47℃温度下培养淋巴细胞,观察PAM对淋巴细胞增殖及分泌细胞因子(TNF-α、IL-4、IL-2和IFN-)含量的影响;研究结果如下:⑴体内试验表明,饲料中添加200mg·kg-1PAM时,不同日龄阶段的雏鸡免疫器官指数上升最为明显(P>0.05),脾脏、胸腺及法氏囊组织结构更加致密,淋巴细胞增多,核质饱满,细胞排列整齐。⑵应用实时荧光定量PCR法检测雏鸡脾脏、胸腺及法氏囊中TNF-α、IL-4、IL-2及IFN-mRNA的表达,结果显示:4种细胞因子表达量均高于对照组,其中以100mg·kg-1、200mg·kg-1的PAM浓度最佳,PAM对淋巴细胞分泌细胞因子的促进作用具有剂量依赖性。⑶体外试验表明,培养液中添加12.5mg·L-1的PAM时,MTS法检测淋巴细胞增殖率最高(P<0.05),高浓度的PAM对淋巴细胞增殖有抑制作用;47℃热应激条件下,培养液中添加12.5mg·L-1PAM可显著提高淋巴细胞的增殖率,与热激对照组相比,提高了38.00%(P<0.05),证实PAM有明显的抗应激能力;PAM试验组培养上清液中TNF-α、IL-4、IL-2及IFN-的含量与同条件对照组相比,差异不显著(P>0.05),但含量均有所增加,表明PAM对淋巴细胞分泌细胞因子功能有促进作用。综上所述,日粮中添加100mg·kg-1-200mg·kg-1的PAM能够促进鸡免疫器官的发育,增强免疫细胞分泌细胞因子的能力;细胞培养液中添加12.5mg·L-1的PAM能促进淋巴细胞的体外增殖,提高细胞因子分泌量,并能缓解热应激对淋巴细胞增殖的抑制作用。
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