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目的:探讨枯否细胞(KCs)和骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离、培养方法;建立KCs与BMSCs体外共培养体系，观察BMSCs对KCs表型的影响，为BMSCs在肝脏移植中的应用提供依据。 方法:建立“一步原位灌注、离体胶原酶消化、差速离心、选择性贴壁”4步法分离大鼠KCs，并对细胞的形态结构、分子标志(ED-1，ED-2、CK18、CD31、α-SMA)、吞噬功能（墨汁、Dil-LDL、Latex-beads颗粒）、抗原呈递功能(MHCⅡ、CD40、CD80、CD86)、炎性介质(TNF-α、NF-κB、IL-10、IL-6)释放功能进行分析与鉴定;运用“全骨髓贴壁法”体外分离、培养、纯化大鼠BMSCs，并对表面分子标志(CD29，CD44，CD45)进行鉴定;建立KCs与BMSCs(1∶1)直接接触共培养体系，共培养组作为实验组，单独培养KCs为对照组，两组细胞均加入内毒素（LPS，1μg/ml），培养24h后，应用Real-time PCR法及Western blot法检测IL-10基因及蛋白的表达、ELISA法检测细胞IL-10、PGE2、IL-6分泌量、流式细胞仪检测MHCⅡ、CD40、CD80、CD86表达。 结果:KCs分离培养实验中:原代KCs获得率高，细胞活率大于95％;传代培养后，细胞表面分子鉴定结果显示，原代及第三代细胞均高表达ED-1/ED-2（阳性率大于90％）、低表达CD31/α-SMA、不表达CK18;功能鉴定显示，第三代KCs与原代KCs均能吞噬大量颗粒、LPS刺激后高表达MHCⅡ/CD40/CD80/CD86及释放大量抗炎因子(IL-10)和促炎因子(TNF-α、NF-κB、IL-6)。BMSCs分离培养实验中:BMSCs增殖能力强、纯度高、细胞活力好;经流式细胞仪鉴定，细胞高表达CD29(99.65％)、CD44(99.81％)，低表达CD45(2.05％)。共培养实验中:Real-time PCR及Western blot检测结果显示，与对照组相比，共培养体系能明显增加IL-10基因和蛋白质的表达（P＜0.05）。LPS刺激后，共培养组IL-10的分泌量和PGE2的分泌量较对照组显著增加（P＜0.005），而IL-6的分泌量较对照组明显降低（P＜0.001）。流式细胞仪检测显示，与对照组高表达MHCⅡ(99.80％)、CD40(99.26％)、CD80(99.93％)及CD86(99.92％)相比，共培养组MHCⅡ(95.18％)、CD40(89.92)、CD80(99.89％)、CD86(94.75％)表达均不同程度下调。 结论:建立了一种新的、简单的、高效的方法分离纯化大鼠KCs。观察到KCs体外培养时自我增殖现象，并验证传代后细胞具有与原代细胞相似的细胞功能。证实BMSCs能干扰KCs功能表达，重塑KCs表型，诱导KCs转变为M2型巨噬细胞，产生抑制免疫应答效应。