胸腺是机体重要的免疫器官,是胸腺细胞分化和T细胞发育成熟的场所。胸腺随着年龄的增加而不断增大直至性成熟时达到高峰,随后就开始发生萎缩和退化。胸腺的退化严重影响胸腺的形态和功能。免疫系统的衰老,尤其是胸腺退化,是老年群体免疫力下降、疫苗接种效果差、癌症患病几率升高等的主要原因。然而,所幸的是,胸腺是有再生潜力的。有研究表明,胸腺在性成熟后发生退化的主要原因可能是由于高水平的循环性激素的变化所引起的。在正常生理状态下,雌雄性中胸腺退化的速度不同,通常雄性胸腺退化的整体速度比雌性快。而通过性类固醇激素消融可以实现胸腺的再生。因此,了解胸腺退化的过程,探究影响胸腺退化的因素,可能能为免疫功能受损患者的治疗提供一个新的治疗思路。以胸腺上皮细胞（thymic epithelial cells,TECs）为主的胸腺基质细胞构成了T细胞生长发育的特殊微环境,胸腺微环境支持T细胞成熟。胸腺微环境的破坏被认为是胸腺退化的主要原因。而胸腺基质细胞,尤其是TECs,是作为性类固醇激素负面作用的主要目标。有研究发现,micro RNAs（mi RNAs）参与了胸腺的发育与退化。mi RNAs是一类长度约22nt左右的非编码小分子RNA,随着研究的深入,越来越多的mi RNA被发现与细胞增殖、细胞凋亡、脂肪代谢、肿瘤发生等方面的调控有关。mi RNAs的功能失调会对机体的生长发育造成影响。mi RNAs对TECs具有重要的调控作用。而与性别相关的mi RNAs对TECs的影响以及其是如何发挥作用的还有待进行深入研究。本研究基于对实验室以往测序结果的分析,从相同年龄、不同性别的小鼠测序结果中筛选出验证过的与性别相关的差异mi RNA,即mi R-199b-5p,以小鼠髓质胸腺上皮细胞系（medullary thymic epithelial cell line 1,MTEC1）细胞为研究对象,通过CCK-8法、Edu掺入法、流式细胞术、实时荧光定量PCR、双荧光素酶报告基因实验等技术,从细胞活力、细胞增殖、细胞周期等方面来探究该mi RNA对胸腺上皮细胞的增殖及功能的影响。通过CCK-8以及Edu细胞增殖相关检测结果可知,mi R-199b-5p对MTEC1细胞的作用呈现时间依赖性,过表达mi R-199b-5p能提高MTEC1细胞活力,促进细胞增殖;反之抑制mi R-199b-5p,MTEC1细胞活力下降,细胞增殖被抑制。而流式结果显示,过表达mi R-199b-5p会使得MTEC1细胞G2/S期细胞数量增多,G1期细胞下降,而抑制mi R-199b-5p会导致MTEC1细胞出现G1期阻滞。此外,mi R-199b-5p能通过调控细胞周期相关的C-myc、Ccnd1、Cdk2、Cdk1等基因表达量的变化来影响MTEC1细胞周期进程。通过靶基因的筛选及验证后可知,Fzd6是与mi R-199b-5p结合的下游靶基因,其能够与mi R-199b-5p相结合,进而影响MTEC1细胞的增殖及周期。结论:具有性别差异的mi R-199b-5p能加快细胞周期进程,通过调控细胞周期相关的基因来促进胸腺上皮细胞增殖;Fzd6是mi R-199b-5p的靶基因,mi R-199b-5p能够通过特异性地与Fzd6的3’UTR区相结合从而发挥作用。总的来说,本研究为mi R-199b-5p与具有性别差异的胸腺退化之间的关系提供新的研究思路。