菜籽皮中原花色素的提取、纯化及其抗氧化性质研究

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原花色素是植物中广泛存在的一类的天然多酚化合物,具有很强的抗氧化活性和清除自由基能力,被广泛应用于医药、保健品、食品及化妆品等诸多领域。国内外关于原花色素的研究多取材于葡萄籽或松树皮,而鲜有关于菜籽皮原花色素(Rapeseed Shell Proanthocyanidins,RSPC)的报道。本文对菜籽皮原花色素的提取、分离工艺进行了研究,通过对RSPC的抗氧化性分析测定,得到以下结论:1)菜籽皮中含有水分11.72%,蛋白质9.23%,粗脂肪10.93%,单宁3.76%,植酸2.45%,硫代葡萄糖苷10.89μmol/g,原花色素2.98%,其中游离态原花色素含量为1.52%,与纤维结合原花色素0.79%,与蛋白质结合原花色素0.67%。测定结果表明,菜籽皮中游离原花色素含量较高,可作为提取原花色素的原料。2)采用响应曲面法对超声波辅助提取菜籽皮原花色素的工艺进行优化,在原料粒度60目,乙醇浓度54%,提取液pH 5.0,料液比1:12,浸提时间为23 min,提取3次的条件下,原花色素提取率最高,其值达91.13%。3)选用2倍体积的石油醚和3倍体积的氯仿对RSPC提取液进行初步纯化后,其含量提高到56.75%。在上述初步纯化的基础上,以大孔吸附树脂为介质作进一步提纯。对6种型号的大孔树脂筛选结果表明,以HPD750大孔树脂作为吸附填料效果最佳,纯化条件为:上样浓度3 mg/mL,样液pH为5.0,上样流速2 mL/min,洗脱液为90 mL 60%乙醇,洗脱速度2 mL/min。此条件下,树脂对原花色素的吸附率为91.9%,解析率为96.8%,冷冻干燥后产品含量可达到96.2%。4)RSPC抗氧化能力研究结果显示其具有很高的还原力,RSPC清除羟自由基、超氧阴离子自由基及DPPH·自由基的能力均高于Vc,且与葡萄籽原花色素无明显差别,抗脂质体体系过氧化能力略低于BHT,高于Vc;同时,菜籽皮原花色素对高温和光照较为敏感,应在低温下避光密封保存。由此表明,RSPC是一种有效的抗氧化剂,具有广阔的开发应用前景。
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