【摘 要】
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【目的】本研究旨在探讨乙酰谷酰胺（NAG）能否改善大鼠臂丛神经根性撕脱伤（BPRA）后运动功能障碍。【方法】1.27只成年雄性SD大鼠被随机等分为假手术组（假手术+生理盐水处理）、损伤组（臂丛神经根性撕脱后再植+生理盐水处理）、NAG处理组（臂丛神经根性撕脱后再植+NAG处理）。2.为研究NAG对大鼠患肢运动功能恢复的影响,损伤并干预后每周进行洗脸实验（TGT）、圆筒实验和体重测量,第8周进行食丸
【基金项目】
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湖南省自然科学基金面上项目（2021JJ30625）； 湖南省临床医疗技术创新引导项目（2020SK51822）； 湖南省卫生健康委资助课题（20200469）； 湖南省卫生健康委重点课题（20201911）；
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【目的】本研究旨在探讨乙酰谷酰胺（NAG）能否改善大鼠臂丛神经根性撕脱伤（BPRA）后运动功能障碍。【方法】1.27只成年雄性SD大鼠被随机等分为假手术组（假手术+生理盐水处理）、损伤组（臂丛神经根性撕脱后再植+生理盐水处理）、NAG处理组（臂丛神经根性撕脱后再植+NAG处理）。2.为研究NAG对大鼠患肢运动功能恢复的影响,损伤并干预后每周进行洗脸实验（TGT）、圆筒实验和体重测量,第8周进行食丸抓取实验。3.为研究NAG对大鼠肱二头肌萎缩程度的影响,损伤并干预后第8周处死大鼠取肱二头肌组织,测量肱二头肌的重量和体积,采用苏木素-伊红染色（HE）法观察肱二头肌的纤维直径和成纤维细胞核数目。4.为研究NAG对大鼠肌皮神经异常形态和再髓鞘化的影响,损伤并干预后第8周处死大鼠取肌皮神经组织,采用快蓝染色（LFB）法观察肌皮神经的直径和LFB-阳性轴突数目,采用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）法检测成髓鞘相关基因（L1CAM、GAP-43、pmp22、mpz、hmgcr、egr2、prx）和脱髓鞘相关基因（ngrx、notch1、pou3f1、sox2）的m RNA含量。5.为研究NAG对大鼠脊髓前角运动神经元存活的影响,损伤并干预后第8周处死大鼠取C5-C7节段脊髓组织,采用尼氏染色法观察脊髓前角的运动神经元数目,采用蛋白质免疫印迹法（WB）检测脊髓前角内生长相关蛋白-43（GAP-43）、p-Akt1和神经元一氧化氮合酶（n NOS）的蛋白含量。6.为研究NAG对大鼠脊髓前角细胞焦亡的影响,损伤并干预后第8周处死大鼠取C5-C7节段脊髓组织,采用WB检测脊髓前角细胞焦亡相关蛋白（NLRP3、GSDMD、pro-Caspase-1、Caspase-1、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18、p-p65）的蛋白含量。【结果】1.在损伤并干预后4周至8周,与假手术组相比,损伤组大鼠的体重显著降低;与损伤组相比,NAG处理组大鼠的体重显著增高。2.洗脸实验结果显示,与假手术组相比,损伤组大鼠的TGT评分显著降低;与损伤组相比,NAG处理组大鼠的TGT评分显著增高。圆筒实验结果显示,与假手术组相比,损伤组大鼠患肢的使用次数显著减少;与损伤组相比,NAG处理组大鼠患肢的使用次数显著增多。食丸抓取实验结果显示,与假手术组相比,损伤组大鼠的IBB评分显著降低;与损伤组相比,NAG处理组大鼠的IBB评分显著增高。3.与假手术组比,损伤组大鼠患侧肱二头肌的重量和体积显著降低;与损伤组相比,NAG处理组大鼠患侧肱二头肌的重量和体积显著增高。HE染色结果显示,与假手术组相比,损伤组大鼠患侧肱二头肌的纤维直径显著减小,成纤维细胞核数目显著增多;与损伤组相比,NAG处理组大鼠的肌纤维直径显著增大,成纤维细胞核数目显著减少。4.LFB染色结果显示,与假手术组相比,损伤组大鼠肌皮神经的直径显著减小,LFB-阳性轴突数目显著减少;与损伤组相比,NAG处理组大鼠肌皮神经的直径显著增大,LFB-阳性轴突数目显著增多。q RT-PCR结果显示,与假手术组相比,损伤组大鼠肌皮神经成髓鞘基因（L1CAM、GAP-43、pmp22、mpz、hmgcr、egr2、prx）的m RNA含量显著降低,脱髓鞘相关基因（ngfr、notch1、pou3f1、sox2）的m RNA含量显著增高;与损伤组相比,NAG处理组大鼠肌皮神经成髓鞘基因（L1CAM、GAP-43、pmp22、mpz、hmgcr、egr2、prx）的m RNA含量显著增高,脱髓鞘相关基因（ngfr、notch1、pou3f1、sox2）的m RNA含量显著降低。5.尼氏染色结果显示,与假手术组相比,损伤组大鼠脊髓前角的运动神经元数目显著减少;与损伤组相比,NAG处理组大鼠脊髓前角的运动神经元数目显著增多。WB结果显示,与假手术组相比,损伤组大鼠脊髓前角GAP-43和p-Akt1的蛋白含量显著降低,n NOS的蛋白含量显著增高;与损伤组相比,NAG处理组大鼠脊髓前角GAP-43和p-Akt1的蛋白含量显著增高,n NOS的蛋白含量降低。6.WB结果显示,与假手术组相比,损伤组大鼠脊髓前角的NLRP3、GSDMD、caspase-1、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18、p-p65的蛋白含量显著增高;与损伤组相比,NAG处理组大鼠脊髓前角的NLRP3、GSDMD、caspase-1、TNF-α、IL-6、IL-1β、p-p65的蛋白含量显著降低,IL-18的蛋白含量降低。【结论】乙酰谷酰胺可促进运动神经元存活和轴突再髓鞘化,从而改善大鼠臂丛神经根性撕脱伤后的运动功能障碍和肱二头肌萎缩,其机制可能与乙酰谷酰胺的抗焦亡作用有关。
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