应用转录组学分析博落回提取物促大鼠生长作用机制

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国家农业农村部194号公告规定,自2020年1月1日起,退出除中药外的所有促生长类药物饲料添加剂品种,这表明中药替代促生长类抗生素时代已到来。中兽药“博落回散”具有抗炎、促生长等作用,为探索其有效成分博落回提取物(含血根碱40%、白屈菜红碱20%、硫酸根40%)的作用机理,丰富其临床依据,本试验以模式动物SD大鼠为研究对象,将其分为高剂量(0.5 mg/kg)、低剂量(0.05 mg/kg)、空白对照组,连续灌胃给药28 d,记录生长性能,试验结束时检测血液学与生化指标,采集肝脏样本进行转录组测序,收集肠道内容物采用16S r RNA测序技术分析肠道菌群。结果显示,与空白对照组相比,低剂量组大鼠增重显著(P﹤0.05),剂量组血液学指标无显著变化,高剂量组谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平升高,其他生化指标无显著性变化。分析肝脏样本转录组测序结果发现,与空白组相比,高剂量组上调基因有104个,下调基因有354个,低剂量组有上调基因116个,下调46个;高、低剂量组相比,上调基因有58个,下调有26个。GO分析结果表明,其主要涉及ATP代谢、分子跨膜运输、蛋白质的分解调节、氮代谢等方面。KEGG富集分析结果表明,其主要涉及细胞增殖分化、氨基酸代谢、脂质转运、嘌呤代谢、糖异生等通路,可提高机体免疫力,促进有丝分裂的进行。所选八个差异基因(RAD15D,BMP7,NFATC4,HDC,RPS6,RPS25,MRP133,COX6C)q RT-PCR验证结果,与转录测序趋势一致。16S r RNA测序结果显示,剂量组肠道菌群的物种丰富度高于空白组,通过将PICRUSt技术分析数据对应到KEGG数据库发现,类脂物代谢作用、能量代谢、其他次生代谢产物的生物合成等通路显著富集,有利于提高能量利用率,提高生长性能。综上所述,通过转录组分析、16S r RNA测序对博落回提取物促进大鼠生长相关机制研究,找出了差异基因、肠道菌群和关键富集通路,为深入研究中兽药“博落回”散的作用机制提供理论依据。
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