药西瓜提取物对两种蔬菜害虫的生物活性及解毒代谢酶的影响

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小菜蛾(Plutella xylostella)和甘蓝蚜(Brevicoryne brassicae)是十字花科蔬菜中两种常见的主要害虫,严重影响蔬菜的产量和品质。化学杀虫剂的大量使用严重危害到食品及环境安全,因此寻找新的适合于防治蔬菜害虫的植物源杀虫剂就显得尤为重要。本论文采用5种有机溶剂及3种提取工艺对药西瓜果实进行提取,筛选出实验室最佳提取方法。研究了药西瓜提取物对小菜蛾和甘蓝蚜的生物活性,明确了药西瓜提取物对两种蔬菜害虫的杀虫活性。探讨了药西瓜正丁醇提取物对小菜蛾和甘蓝蚜体内解毒酶的影响,为植物源杀虫剂的开发利用及蔬菜害虫的绿色防治提供参考依据。主要研究结果如下:1.药西瓜提取工艺研究结果表明:选用甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚5种极性不同的有机溶剂,采用冷浸法、超声波提取法、索氏提取法3种提取方法分别提取药西瓜果实中的活性物质,从提取率及实际生产等方面综合考虑,得出实验室最经济实用的提取方法为超声波提取法。2.药西瓜提取物对蔬菜害虫的生物活性:以蔬菜害虫小菜蛾和甘蓝蚜为研究对象,研究了超声波提取法的药西瓜5种有机溶剂提取物对供试昆虫不同作用方式的杀虫效果。结果表明:(1)药西瓜5种有机溶剂提取物中以药西瓜正丁醇提取物对小菜蛾和甘蓝蚜的触杀活性最高,触杀处理72 h后的致死中浓度LC50分别为5.59 mg/mL、1.37 mg/mL,药西瓜提取物对甘蓝蚜的触杀效果明显大于对小菜蛾的触杀效果。(2)药西瓜提取物对小菜蛾的胃毒作用试验中,正丁醇提取物胃毒效果最好,以最高浓度100 mg/mL下处理小菜蛾,72 h的平均校正死亡率为47.78%。(3)药西瓜提取物对小菜蛾的非选择性拒食作用探究中,乙酸乙酯提取物的非选择性拒食率在供试的5种溶剂提取物中拒食效果最明显,以最高浓度为100 mg/mL处理小菜蛾,24 h和48 h的非选择性拒食率分别为61.61%和54.02%。(4)药西瓜提取物对甘蓝蚜的忌避作用中,在最高处理浓度100 mg/mL条件下,药西瓜正丁醇提取物平均忌避率最高,为93.22%,药西瓜乙醇提取物平均忌避率最低,仅为71.41%。3.药西瓜正丁醇提取物对小菜蛾和甘蓝蚜体内解毒代谢酶活力的影响:触杀作用处理试虫后测定其体内乙酰胆碱酯酶(AChE)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和羧酸酯酶(CarE)酶的活性,旨在从酶学角度探索药西瓜提取物对两种蔬菜害虫的作用靶标以及试虫体内解毒酶系活力影响。结果表明:(1)药西瓜正丁醇提取物对小菜蛾和甘蓝蚜体内AChE有一定的影响,在LC10为0.96 mg/mL浓度下处理24 h后,小菜蛾体内AChE活力与对照差异不显著,各处理浓度下的甘蓝蚜体内AChE活力均显著低于对照,随着处理浓度增加,提取物对小菜蛾和甘蓝蚜体内AChE抑制作用逐渐增加。随着处理时间的延长,小菜蛾体内AChE活力开始受到抑制而后被激活,甘蓝蚜在24h时,体内AChE活力抑制达到最大。(2)药西瓜正丁醇提取物对小菜蛾和甘蓝蚜体内GST活力具有不同程度的影响。在低浓度0.96 mg/mL时小菜蛾体内GST活力被激活,在高浓度下被抑制。随着处理时间的延长,小菜蛾和甘蓝蚜体内GST活力均受到一定的抑制,并在处理后36 h时对GST活力的抑制力均达到最大。(3)药西瓜正丁醇提取物对小菜蛾体内CarE活力在不同浓度下均表现为抑制作用,随着处理浓度的增加,抑制作用越明显。药西瓜正丁醇提取物对甘蓝蚜体内CarE大致表现为抑制作用,在低浓度0.30 mg/mL处理时,其CarE活力表现为诱导作用,随着浓度的增加,CarE活力下降,抑制作用较明显。随着处理时间的延长,处理12-36 h后小菜蛾体内CarE活力开始有大幅度上升的趋势并表现为激活状态,处理后甘蓝蚜体内CarE活力波动大但幅度不明显,总体仍表现为抑制状态。
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