TGF-β1诱导鼻咽癌细胞上皮—间质转化的研究

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目的鼻咽癌是中国南部最常见的头颈部肿瘤之一,大部分患者死于转移。研究表明上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)是促进肿瘤侵袭转移的重要机制。转化生长因子β1(transforming growth factor beta-1,TGF-β1)已被证实为EMT的主要诱导剂。本实验目的是探讨TGF-β1是否可以诱导鼻咽癌细胞CNE-1发生EMT以及对鼻咽癌细胞的运动侵袭能力的影响。方法将体外培养的鼻咽癌细胞CNE-1用10ng/mL TGF-β1干预不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态学变化;Western Blot、细胞免疫荧光及实时定量RT-PCR分别检测上皮标志物E-cadherin,间质标志物N-cadherin和转录因子Slug基因和蛋白表达变化;划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力变化。结果倒置显微镜观察到TGF-β1干预后CNE-1细胞形态由鹅卵石样外观变为长梭形;Western Blot、免疫荧光和定量RT-PCR显示上皮标志蛋白E-cadherin表达下调,间质标记蛋白N-cadherin以及转录因子Slug的表达上调;此外,CNE-1细胞迁移和侵袭能力增强。结论TGF-β1诱导鼻咽癌CNE-1细胞发生EMT并增强其迁移及侵袭能力。
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