背景:神经免疫失调导致的神经炎症反应在许多神经系统疾病的发展及转归中具有重要作用。小胶质细胞作为中枢神经系统的常驻巨噬细胞,具有高度的可塑性,可根据所处疾病微环境发生不同类型的活化以改变疾病进程,因此在维持中枢神经系统免疫稳态及神经炎症反应中具有核心的地位。胶质母细胞瘤是最常见,恶性程度最高的中枢神经系统肿瘤,其发展也与神经免疫调节失调后发生的免疫抑制高度相关。胶质母细胞瘤来源的细胞外囊泡可以通过传递遗传物质和蛋白质调控小胶质细胞的活化,活化后的小胶质细胞具有强烈的免疫抑制特性并重塑胶质母细胞瘤免疫微环境,形成恶性循环支持肿瘤生长,那么探究胶质母细胞瘤微环境中肿瘤细胞是如何与小胶质细胞相互作用,对于理解小胶质细胞在不同病理状态下活化状态改变具有重要意义,但其具体机制有待进一步研究。目的:首先明确胶质母细胞瘤来源的细胞外囊泡对小胶质细胞的表型影响,在此基础上结合生物信息学分析探讨细胞外囊泡内RAC1调节小胶质细胞免疫表型改变的分子机制,旨在理解小胶质细胞在不同病理状态下活化状态改变及其分子机制。方法:超速离心法提取胶质母细胞瘤U87及C6细胞来源的细胞外囊泡并干预原代小胶质细胞及BV2小胶质细胞。CCK-8测定干预前后小胶质细胞增殖,NO试剂盒测定干预小胶质细胞炎症因子NO释放情况,Western blot检测小胶质细胞M1/M2标志物表达。基于数据库筛选RAC1蛋白,Western blot检测RAC1在细胞外囊泡及小胶质细胞中的表达水平。Western blot检测细胞外囊泡干预前后小胶质细胞内AKT及其磷酸化水平,NFE2L2在细胞核内外的表达情况,并结合生物信息学分析预测RAC1可能参与调控的活化通路。结果:胶质母细胞瘤来源细胞外囊泡对小胶质细胞增殖及NO释放无显著影响,但促进小胶质细胞M2型标志物CD206的表达。RAC1在胶质母细胞瘤组织中高表达且与患者不良预后及免疫细胞浸润有关。同时RAC1可以被胶质母细胞瘤来源细胞外囊泡包裹并被小胶质细胞吞噬。吞噬了含有RAC1的细胞外囊泡的小胶质细胞AKT磷酸化水平增强,且转录因子NFE2L2的核转位增强。利用生物信息学联合Motif预测得到NFE2L2可能调控的靶基因为:IKBKG、LAMC1、GAPDH,其中IKBKG的表达与M2型巨噬细胞标志物CD163、VSIG4、MS4A4A的表达具有相关性,基于KEGG分析发现IKBKG参与了AKT/NFE2L2的信号转导过程。结论:胶质母细胞瘤来源细胞外囊泡可以诱导小胶质细胞向M2型激活。RAC1在胶质母细胞瘤中高表达且与巨噬细胞浸润及患者不良预后相关。胶质母细胞瘤来源细胞外囊泡内RAC1可能通过活化AKT并促进NFE2L2核转位调节IKBKG水平进而与小胶质细胞M2表型形成有关。