【摘 要】
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目的:观察术前玻璃体腔注射康柏西普(Conbercept)辅助玻璃体切除(pars plana vitrectomy,PPV)手术治疗增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)的疗效;鉴定玻璃体腔注射康柏西普(intravitreal conbercept,IVC)后玻璃体液差异表达蛋白,探讨康柏西普对玻璃体液蛋白质的影响,进一步分析IV
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目的:观察术前玻璃体腔注射康柏西普(Conbercept)辅助玻璃体切除(pars plana vitrectomy,PPV)手术治疗增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)的疗效;鉴定玻璃体腔注射康柏西普(intravitreal conbercept,IVC)后玻璃体液差异表达蛋白,探讨康柏西普对玻璃体液蛋白质的影响,进一步分析IVC对PDR治疗作用机制。方法:本实验为前瞻性临床对照研究。随机选取2018年1月至2018年12月就诊于天津医科大学眼科医院并确诊为PDR的患者40例40眼纳入本研究,将其分为两组,一组为27G-PPV术前3天接受IVC治疗的PDR患者20例20眼(定义为IVC组),另一组为单纯接受27G-PPV手术的PDR患者20例20眼(定义为PDR组)。记录并分析患者术前、术后最佳矫正视力(best-corrected visual acuity,BCVA)、眼底情况、疾病严重程度等信息。收集入组患者的玻璃体液,样本混合后去除玻璃体液中的高丰度蛋白质。采用串联质谱标记(tandem mass tag,TMT)的定量蛋白质组学方法分析IVC诱导的玻璃体液蛋白质水平变化。对差异表达蛋白进行生物学信息分析及蛋白-蛋白相互作用分析。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)测定差异表达蛋白浓度,并验证蛋白质组学结果的准确性。结果:1、40例40眼入组并36例36眼完成术后随访。两组患者性别、糖化血红蛋白水平、糖尿病病程、术前BCVA(Log MAR)差异均无统计学意义(P>0.05)。2、经两组比较显示,IVC组患者年龄较PDR组低(P=0.008),术中出血率低(P=0.026),手术时间短(P=0.027)。术中硅油填充率两组差异无统计学意义(P>0.05)。术后1天、1周、12周IVC组患者BCVA显著优于PDR组(p<0.05)。3、随访期间两组患者均无严重并发症。4、玻璃体液高丰度蛋白被有效去除。TMT标记定量蛋白质组学定量检测到853种蛋白质。生物信息学分析表明,差异表达蛋白与多种生物学过程和信号传导途径有关,包括细胞外基质组织和补体激活;IVC组高水平表达蛋白质与细胞外基质组织有关;差异表达蛋白参与构成细胞内外组分,且具有多种分子功能,如细胞外基质结构成分、血管内皮生长因子结合和血管内皮生长因子受体(Vascular endothelial growth factor,VEGFR)活性。5、蛋白质-蛋白质相互作用分析显示差异表达蛋白参与纤维化、新生血管和炎症等信号通路。结论:1、与单纯27G玻璃体切除术治疗PDR相比,术前3天玻璃体腔注射抗VEGF药物可降低玻璃体切除术的复杂程度,具有明显优势。且患者术后可获得更佳视力预后。2、除VEGF外,康柏西普可影响PDR患者玻璃体多种蛋白水平,差异表达蛋白参与纤维化、新生血管和炎症信号通路,提示IVC参与相关信号通路。多种信号通路是康柏西普治疗PDR的机制,也是导致视网膜前增殖膜加重的关键途径。3、去除玻璃体液高丰度蛋白质联合TMT标记定量蛋白质组学技术为筛选有生物学意义的低丰度差异表达蛋白提供良好的平台,进而为探究PDR治疗新靶点奠定了基础。
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