编码人84KD的精子蛋白cDNA克隆BSD-84，及编码人20KD的睾丸蛋白cDNA克隆BED-20已经分别从人的睾丸lambda gt11 cDNA表达文库中筛选出来。为了确定这两个基因在染色体的位置，一个1.35kb的BSD-84-Bam HI cDNA片段与另一个1.65kb的BED-20-BamHI片段被用作探针，分别与人的染色体进行原位杂交。原位杂交采用~3H标记的放射自显影法及地高辛标记的酶联分析法。由于涉及原位杂交的因素很多，因而本文对原位杂交过程中的某些因素进行了探索。实验的主要结论如下： (1) 84KD的精子蛋白基因定位于人1号染色体的1P35-36。通过放射自显影后的250个R-带的人中期染色体分裂相分析，有1257个杂交银颗粒(信号)被统计，其中有22.3％的银颗粒位于1号染色体上，经统计学处理P＜0.005，具有极显著性差异。其中位于1号染色体的银颗粒有40％位于1P35-36区。地高辛原位杂交结果与此结论相符，用杂种体细胞杂交分析也旁证了这个结论。 (2) 人20KD睾丸蛋白定位于14号染色体的q31-末端。通过检查放射自显影后的87个R-带中期分裂相及56个不分带的中期分裂相，320个银颗粒(R-带染色体上)及192个银颗粒(非显带染色体上)被统计，结果在14号染色体上的分布比例分别为11.56％与11.62％。经统计学处理均具有极显著差异(P＜0.005)。用地高辛检测的原位杂交结果及用杂种体细胞杂交分析的结果也证明了上述结论。在14号染色体上分布的所有银颗粒中有5％集中在q31-末端。 (3) 除了两个特异的杂交峰，在1与14号染色体外的其它染色体上均无特异的杂交峰出现，统计学处理没有显著差异(P＞0.05)。 (4) 用5-Brdu掺入到染色体中，在杂交前用紫外光照射，无特异性杂交信号出现。提示紫外光照后使染色体DNA发生了断裂。