针灸对帕金森病模型小鼠黑质与外周血Th17/Treg免疫失衡的调节机制研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cqjava
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:1.整理古代文献中针灸治疗“颤”、“震颤”、“颤证”、“颤振”、“颤症”、“掉”、“摇动”(《中华医典》)、“震颤摇动”(《古代针灸临床文献信息库》)的病因病机、治疗方法和针灸处方,为现代临床应用提供指导和处方选穴参考。2.探讨针灸治疗帕金森病可能的作用机制,揭示针灸在调节黑质与外周血Th17/Treg免疫平衡、调节细胞因子表达、抑制IL-17RA/NF-κB信号通路中的作用,进而阐释针灸调控帕金森病神经炎症、缓解帕金森病症状的作用机制,为针灸治疗帕金森病提供科学依据。方法:第一部分:采用计算机检索结合手工翻检的方式,以“颤”、“震颤”、“颤证”、“颤振”、“颤症”、“掉”、“摇动”(《中华医典》)、“震颤摇动”(《古代针灸临床文献信息库》)为主要检索字段对两个数据库进行检索。按照病因病机、治疗原则、治疗方法等进行系统分类整理,采用文献辨析、归纳分析等方法,梳理中医对于本病认识的发展源流,分析针灸治疗本病的特点、常用方法与特色疗法,总结其一般规律。第二部分:健康SPF级8周龄雄性C57小鼠,随机分为空白组和造模组,其中造模组采用MPTP腹腔注射的方法制备PD小鼠模型。造模成功后,将造模组小鼠随机分为模型组、针刺组、针刺艾灸组、雷沙吉兰组。空白组和模型组小鼠不进行任何干预,只作与治疗组相同的抓取固定;针刺组小鼠予以针刺“百会”、双侧“阳陵泉”治疗;针刺艾灸组在针刺组干预的基础上予以艾灸“关元”;雷沙吉兰组予以雷沙吉兰溶液灌胃。干预结束后,检测各组小鼠转棒试验(Rota Rod test,ORT)评分、黑质神经元情况;免疫荧光技术检测各组小鼠黑质TH、α-syn的定位及定量;流式细胞术检测各组小鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+、CD4+RORγt+淋巴细胞数;ELISA法检测各组小鼠血清TNF-α、IL-4、IL-17、IL-22、IL-10、TGF-β、IFN-γ及各组小鼠黑质IL-22、TNF-α的含量;RT-q PCR法检测各组小鼠黑质i NOS、TNF-α、TGF-β的m RNA表达;免疫印迹法检测各组小鼠黑质致密部IL-17RA、NF-κB、p-IκBα、IκBα、p-TAK1、TAK1、Act1的蛋白表达。结果:第一部分古代文献中记载共22个常用穴位,总频次为62,其中合谷、太冲、阳陵泉、中渚、曲池、后溪、足临泣、曲泽、腕骨、足三里出现频率较高(频次≥3),频次前五位的穴位为合谷(频次7,频率11.3%)、太冲(频次6,频率9.7%)、阳陵泉(频次5,频率8.1%)、中渚(频次5,频率8.1%)、曲池(频次5,频率8.1%),占总量的45.2%。此外,古代文献中还提到关元、昆仑、阳溪、绝骨、公孙、内关、天井、肝俞、神门、大陵、尺泽、行间。第二部分1.ORT评分:与空白组相比,模型组小鼠OPT评分降低(P<0.05);与模型组相比,针刺组、针刺艾灸组、雷沙吉兰组小鼠OPT评分升高(P<0.05)。2.Nissl染色:与空白组相比,模型组小鼠黑质神经元数量降低(P<0.05);与模型组相比,针刺组、针刺艾灸组小鼠黑质神经元数量升高(P<0.05)。3.针灸对PD小鼠黑质区TH、α-syn蛋白表达的影响:与空白组相比,模型组小鼠黑质区TH蛋白表达降低(P<0.05),α-syn蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,针刺组、针刺艾灸组、雷沙吉兰组小鼠黑质区TH蛋白表达均升高(均P<0.05)、α-syn蛋白表达均降低(均P<0.05)。4.针灸对PD小鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+、CD4+RORγt+淋巴细胞的影响:与空白组相比,模型组小鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+淋巴细胞数量降低(P<0.05),CD4+RORγt+淋巴细胞数量升高(P<0.05);与模型组相比,针刺组、针刺艾灸组、雷沙吉兰组小鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+淋巴细胞数量均升高(均P<0.05)、CD4+RORγt+淋巴细胞数量均降低(均P<0.05)。5.针灸对PD小鼠血清TNF-α、IL-4、IL-17、IL-22、IL-10、TGF-β、IFN-γ含量的影响:与空白组相比,模型组小鼠血清TNF-α、IL-4、IL-17、IL-22、IFN-γ含量升高(P<0.05),IL-10、TGF-β含量降低(P<0.05);与模型组相比,针刺组、针刺艾灸组、雷沙吉兰组小鼠血清TNF-α、IL-4、IL-17、IL-22、IFN-γ含量降低(P<0.05),IL-10、TGF-β含量升高(P<0.05)。6.针灸对PD小鼠黑质IL-22、TNF-α含量的影响:与空白组相比,模型组小鼠黑质IL-22、TNF-α含量升高(P<0.05);与模型组相比,针刺组、针刺艾灸组、雷沙吉兰组小鼠黑质IL-22、TNF-α含量均降低(均P<0.05)。7.针灸对PD小鼠黑质i NOS、TNF-α、TGF-βm RNA表达的影响:与空白组相比,模型组小鼠黑质i NOS、TNF-αm RNA表达升高(P<0.05),TGF-βm RNA表达降低(P<0.05);与模型组相比,针刺组、针刺艾灸组、雷沙吉兰组小鼠黑质i NOS、TNF-αm RNA表达降低(均P<0.05),TGF-βm RNA表达升高(均P<0.05)。8.针灸对PD小鼠黑质致密部IL-17RA、NF-κB、p-IκBα、IκBα、p-TAK1、TAK1、Act1蛋白表达的影响:与空白组相比,模型组小鼠黑质致密部NF-κB蛋白表达、p-IκBα/IκBα蛋白表达比率升高(P<0.05);与模型组相比,针刺组、针刺艾灸组、雷沙吉兰组小鼠黑质致密部NF-κB蛋白表达、p-IκBα/IκBα蛋白表达比率降低(P<0.05)。结论1.古代文献中治疗帕金森病的主要穴位有合谷、太冲、阳陵泉,最常用的治疗方法为针刺和艾灸。2.针灸能有效减轻MPTP诱导的PD小鼠黑质α-syn的异常积聚,并可以保护黑质多巴胺能神经元。3.针灸可通过调节黑质和外周血Th17/Treg免疫失衡、调节相关细胞因子表达、抑制IL-17RA/NF-κB信号通路的激活,进而起到调控帕金森病神经炎症、缓解帕金森病症状之目的。
其他文献
伴随InSAR技术持续发展,其在矿区地质灾害调查领域应用范围与应用效果均有着显著提升。基于此技术,针对大区域连续变形展开跟进监测,有助于对于区域矿区地质灾害进行甄别与勘测。再者搭配高分辨率光学遥感数据,展开孕灾地质环境和矿区地质灾害体初步解译工作,圈定重点变形区和矿区地质灾害隐患类型、范围、变形趋势。为矿区地质灾害风险调查评价提供基础依据。
期刊
目的:评价八宝丹治疗肝硬化轻微肝性脑病(Minimal Hepatic Encephalopathy,MHE)的临床疗效,探讨其抗炎作用机制并筛选有效活性成分,希冀为临床治疗MHE供一种新思路。方法:1.八宝丹对MHE患者的治疗作用评价(临床试验):采用随机对照研究设计,纳入并观察湿热蕴结型肝硬化MHE患者共62例,随机分为乳果糖对照组31例,八宝丹联合乳果糖治疗组31例,两组治疗周期均为8周,检
学位
目的:基于代谢组学和宏基因组学技术手段,探讨地麦活性糖(ROS+MD,RM)改善Ⅱ型糖尿病的药效及肠道菌群多样性分析研究。方法:(1)以高膳食+STZ诱导SD大鼠Ⅱ型糖尿病为模型,考察RM对大鼠空腹血糖、血清炎症因子、血脂水平等指标的影响,并确定地麦活性糖的最佳比例。(2)确定药物最佳比例后,对量效关系展开实验,同时引入抗生素因素,考察大鼠空腹血糖、腹腔糖耐量实验(Intraperitoneal
学位
在落实“双碳”目标和加快构建现代能源体系的背景下,掺氢发电是实现天然气发电产业的低碳发展及与新能源协同发展的必然趋势。通过综述天然气掺氢发电发展现状及趋势,提出通过掺氢燃烧实现天然气发电低碳发展的产业链设想,并以深圳大鹏某电厂为例分析其可行性。(1)清洁的蓝氢、绿氢产能是制约掺氢发电技术应用规模扩大的重要因素。随着新型电力系统下新能源发电比例的提升与碳捕集及利用技术的进步,中国氢能产业将进一步扩大
期刊
目的:研究中药补肾健脾利湿方治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎的临床疗效,初步探讨以补肾法为基础的补肾健脾利湿方治疗慢性乙型肝炎的作用机制。方法:1.利用上海中医药大学附属曙光医院肝病科前期承担国家艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技专项(课题编号:2012ZX10005004-002)部分临床病例资料和样本,其中补肾健脾利湿方联合恩替卡韦(ETV)为治疗组,以单用ETV为对照组,对479例(治疗组
学位
[目的]对心肌缺血再灌注损伤小鼠在心肌缺血后不同时间进行电针“郄门穴”治疗,通过观察小鼠心脏功能、心肌组织的病理变化,明确电针“郄门穴”后处理对心肌缺血再灌注损伤的作用以及最佳的治疗时间窗口;通过观察焦亡相关指标的变化,探索电针“郄门穴”后处理对心肌缺血再灌注损伤细胞焦亡的影响;基于TLR4/NF-κB信号通路探讨电针“郄门穴”后处理抑制细胞焦亡的作用机制。[方法]第一部分实验:60只C57小鼠分
学位
目的:建立基于德尔菲专家咨询的肛瘘术后复发风险评估的Logistic回归预测模型,评价其预测肛瘘术后复发的准确度、敏感度和特异度,为早期筛查肛瘘术后复发的高危患者提供替代工具,帮助外科医生更好地了解早期肛瘘术后复发的病因及预后策略。方法:第一章:在前期文献系统评价的基础上,结合临床经验知识,制定一份多维度影响肛瘘术后复发的危险因素列表,并按照与患者相关、与瘘管相关、与手术相关等领域形成一份在线调查
学位
膝骨关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)是临床常见骨关节炎,属第4位致残性疾病,主要表现为疼痛和功能障碍,造成沉重经济负担。尤其是慢性疼痛迁延反复,影响较大,常引发不良情绪,严重影响生活质量。在慢性疼痛的发生和缓解中脑中枢调控起关键作用,在磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)中可表现为脑灰质或脑白质结构、脑功能的变化。推拿是KOA临床指南推
学位
背景及目的:肝脏巨噬细胞包括定居巨噬细胞(KCs细胞)以及从外周血循环募集的骨髓来源巨噬细胞(BMDMs),在维持肝脏免疫稳态、促进或逆转肝纤维化发展过程中起着重要作用。扶正化瘀方(FZHY)的抗肝纤维化疗效已经在大量的基础和临床实验中得到证实,但FZHY是否可通过调节BMDMs肝内募集以及表型极化从而逆转肝纤维化尚未有研究报导。本研究拟通过临床、动物和细胞实验,探讨FZHY通过调控BMDMs向肝
学位
目的芪冬宁方是本课题组应用随机森林算法对上市中成药-金复康口服液二次优化筛选出的具有抗肺癌效果的中药复方。本研究从自噬的调控角度,通过体内体外研究,探索芪冬宁方调控自噬抗非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)增殖及转移的效应及机制。方法1.芪冬宁方对NSCLC细胞增殖、迁移、侵袭的体外研究。应用CCK-8法,检测干预48h后,不同浓度的芪冬宁方对非小细胞肺
学位