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目的胃癌是导致恶性肿瘤死亡的重要病种之一,含铂的化疗是胃癌特别是晚期胃癌的重要治疗手段。为了进一步提高顺铂的治疗效果,从机制上探索耐药性的产生显得尤为重要。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)现已成为肿瘤研究的新热点。本课题选择胃癌顺铂耐药细胞中表达失调的lncRNA,并且重点探究在胃癌细胞中lncRNA FAM230B-206对顺铂耐药性的影响以及调控机制。方法利用基因芯片检测胃癌顺铂耐药细胞SGC7901/DDP和亲本细胞SGC7901中差异表达的lncRNA。对表达差异分析和邻近生物信息分析筛选表达差异显著的lncRNA FAM230B-206为胃癌顺铂耐药相关的分子,利用RT-PCR技术验证FAM230B-206表达差异。采用慢病毒转染上调SGC7901/DDP细胞中FAM230B-206的表达,下调SGC7901细胞中FAM230B-206的表达,分别构建稳转细胞。提取RNA后经过RT-PCR验证转染后基因表达变化。采用CCK-8法检测细胞在顺铂作用后的生存情况及IC50,并判断FAM230B-206表达上调或者下调对胃癌细胞对顺铂药物敏感性的变化情况。通过流式细胞仪分析FAM230B-206表达上调或者下调后在一定时间后胃癌细胞凋亡的影响。生物信息分析FAM230B-206可能通过miR-532-3p和PAX6参与胃癌细胞顺铂耐药性的改变。同样利用慢病毒上调或者下调耐药细胞和亲本细胞中miR-532-3p表达,采用CCK-8法再次检测细胞耐药性变化情况。通过RT-PCR检查上调或者下调 FAM230B-206 后 miR-532-3p 表达情况,验证 FAM230B-206 和 miR-532-3p 表达的相关性。免疫蛋白印记技术(Western blot)检测上调或者下调FAM230B-206和miR-532-3p后PAX6表达情况。对实验结果采用GRAPHPAD和SPSS软件进行统计分析,数据均以均数士标准差表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,p<0.05判为有统计学差异。结果基因芯片检测结果提示,SGC7901/DDP细胞和SGC7901细胞中存在1077个lnc RNA表达显著差异,其中FAM230B-206在SGC7901/DDP相比SGC7901显著高表达(Fc=4.88),且差异具有统计学意(p<0.01),可能是参与胃癌顺铂耐药的关键分子。利用慢病毒转染、嘌呤霉素筛选RT-PCR验证后后建立FAM230B-206过表达稳转细胞株(OE-FAM230B-206)、FAM230B-206 低表达稳转细胞株(KD-FAM230B-206)及相对应的空载稳转细胞株(NC-SGC7901和NC-SGC7901/DDP)。通过CCK-8细胞毒性试验表明OE-FAM230B-206相对NC-SGC7901和SGC7901,IC50显著上升,细胞对顺铂耐药性增强,而 KD-FAM230B-206 相对 NC-SGC7901/DDP 和 SGC7901/DDP,IC50显著下降,细胞对顺铂耐药性减弱,差异均具有统计学意义。流式细胞仪检测细胞顺铂作用48小时后细胞凋亡率表明,下调FAM230B-206表达导致NC-SGC7901/DDP和SGC7901/DDP凋亡比例显著增加,上调FAM230B-206表达导致NC-SGC7901和SGC7901凋亡比例显著降低。生物信息分析FAM230B-206和miR-532-3p有互补配对,并且PAX6是FAM230B-206和miR-532-3p的共同作用靶点。在SGC7901/DDP和SGC7901 中 miR-532-3p表达和 FAM230B-206 相反,将 miR-532-3p 在 SGC7901/DDP下调使顺铂耐药性降低,在SGC7901上调FAM230B-206的表达使顺铂耐药性提高。在SGC7901/DDP细胞中下调FAM230B-206表达,则miR-532-3p表达上升且PAX6表达下降;反之在SGC7901细胞上调FAM230B-206、miR-532-3p表达下降且PAX6表达上升。结论胃癌顺铂耐药细胞相对亲本细胞lncRNA FAM230B-206显著高表达。通过降低FAM230B-206表达可以显著抑制胃癌顺铂耐药性,而升高FAM230B-206表达使是胃癌细胞对顺铂耐药性提升。其机制可能是FAM230B-206通过miRNA-532-3p/PAX6参与调节胃癌细胞对顺铂的敏感性。通过本研究可能为逆转胃癌顺铂耐药性,提升化疗敏感度提供新思路。