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目的:1本研究拟观察小鼠肝脏血流的变化,运用激光散斑成像技术观察小鼠肝脏血流灌注量的变化,研究针刺对酒精肝小鼠肝脏血流灌注量及血流调控物质的影响,探讨电针对肝脏微循环的效应机制,为针刺内脏效应奠定实验及临床基础。2观察急性肝脏损害小鼠电针刺激对吲哚菁绿(ICG)在肝脏代谢的影响,探讨电针对肝脏代谢功能的调节机制,同时探索活体荧光成像技术在针刺机制研究方面的应用。方法本研究分为三部分(1)第一部分:激光散斑成像方法观察电针对酒精肝小鼠肝脏血流灌注量的影响。实验分为四个组,对照组、对照电针组、模型组、模型电针组,每组10只小鼠,运用激光散斑连续观察30min内小鼠肝脏血流变化,每隔5min采集肝脏血流灌注图像一次,比较组内血流灌注量变化、组间同时间点血流灌注量变化,分析电针对血流变化的时-效关系。(2)第二部分:电针对酒精肝小鼠肝脏血流变化影响的血管调控机制研究,每组小鼠散斑成像结束后,采集肝脏组织,运用放射免疫法检测正常组小鼠肝脏组织内血栓素(TXA-2)、前列环素(PGI-2)、的含量和模型组、模型电针组一氧化氮(NO)、去甲肾上腺素(NE)的含量,分析上述物质与血流变化的关系。(3)动物活体成像技术观察电针对酒精性肝损害小鼠肝代谢的影响,将30只健康昆明种小鼠分为三组,对照组、模型组和模型电针组,每组10只,造模12h后,均采用尾静脉注射ICG,模型电针组针刺太冲穴,模型组、对照组不做任何针刺,用小动物活体荧光成像仪观察电针20min与停针60min内ICG在肝脏的强度和分布。结果第一部分1激光散斑血流图像直观分析显示,对照组和模型组在实验观察的30min内,血流分布均匀且变化不大,数据分析呈上升趋势,但各时间点平均值和0min的平均值进行比较,无统计学意义(P>0.05)。激光散斑血流图像直观分析显示,对照组和模型电针组在实验观察的30min内,肝脏血流变化较大,随着观察时间的延续,血流颜色越来越深,直至实验结束,数据分析显示针刺后,小鼠肝脏血流灌注量增加,各时间点平均值和0min平均值进行比较,对照电针组从15min到30min均有统计学意义(P<0.05),模型组从5min到30min均有统计学意义(P<0.05)。2对各实验组进行组间两两同时间点比较,以下几组间较多时间点出现统计学意义(P<0.05),对照组和模型组、对照电针组和模型组、对照组和模型电针组、对照电针组和模型电针组。第二部分1小鼠肝组织血管调控物检测总体分析表明:针刺可以促使TXA-2含量降低,PGI-2含量升高,T/P值变小;针刺可以促使NO升高,NE降低。第三部分1ICG注射即刻,各组小鼠肝脏发出荧光,随着观察时间的增加,各组荧光亮度和面积均增加,在注射ICG30min左右时,荧光亮度和面积开始减弱,并一直持续到实验结束。2注射即刻,荧光亮度与面积分布依次为:模型组>对照组>模型电针组,在停针60min内均呈现这一规律;对光强度的数值统计结果为:模型组>对照组>模型电针组,正常组和模型电针组比较出现统计学差值(P<0.05),模型组与模型电针组比较出现统计学差值(P<0.05)。结论1电针可以有效增加正常小鼠和酒精肝小鼠肝脏组织内的血流灌注量。2电针可以降低小鼠肝脏组织内TXA-2含量,增加PGI-2含量,促使T/P值变小;针刺可以有效增加酒精肝小鼠肝脏组织内NO含量,降低NE的含量3电针可以加速急性酒精性肝损害小鼠肝脏对ICG的代谢