【摘 要】
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目的:研究TM4SF5（transmembrane 4 L six family member 5）在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）中的表达及其临床意义,探讨TM4SF5对结直肠癌细胞生物学功能的影响,为结直肠癌的分子靶向治疗提供新的策略。方法:组织芯片收集103例CRC患者的标本,其中包括CRC组织和对应的癌旁正常组织,应用免疫组织化学染色（Immunohistochem
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目的:研究TM4SF5（transmembrane 4 L six family member 5）在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）中的表达及其临床意义,探讨TM4SF5对结直肠癌细胞生物学功能的影响,为结直肠癌的分子靶向治疗提供新的策略。方法:组织芯片收集103例CRC患者的标本,其中包括CRC组织和对应的癌旁正常组织,应用免疫组织化学染色（Immunohistochemistry,IHC）的方法对TM4SF5进行染色,评估其在结直肠癌组织中的蛋白表达水平。通过Wilcoxon秩和检验方法统计分析结直肠癌和相应正常组织中TM4SF5染色H-score评分之间是否存在显著差异,利用卡方（χ~2）检验和Kaplan-Meier生存分析法,分别分析结直肠癌组织中TM4SF5高表达或低表达与患者总生存期（OS）和临床相关病理特征之间是否具有相关性。使用Cox单/多因素模型评价不同临床特征与结直肠癌患者之间预后的关系。应用实时定量PCR（Real time quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-q PCR）检测TM4SF5的在结直肠癌细胞和正常结肠上皮细胞中的表达水平。通过si RNA技术敲低过表达TM4SF5的结直肠癌细胞株,构建TM4SF5稳定敲低的结直肠癌细胞株,并通过RT-q PCR比较TM4SF5敲低组（TM4SF5-sh）和对照组（NC）之间TM4SF5表达差异,验证细胞株构建成功。通过细胞功能实验检测结直肠癌细胞株TM4SF5敲低组（TM4SF5-sh）和对照组（NC）之间细胞生物学功能的差异。结果:免疫组织化学研究表明,与癌旁组织比较,结直肠癌组织中TM4SF5的蛋白表达水平显著上升（P＜0.0001）。TM4SF5高表达结直肠癌患者OS与TM4SF5低表达结直肠癌患者相比明显缩短（P＜0.05）。TM4SF5的表达水平与临床病理特征无关。COX模型显示,TM4SF5的表达（P＜0.001）和TNM分期（P=0.025）可认为是结直肠癌的独立预后风险因素。RT-q PCR分析显示,结直肠癌细胞系中TM4SF5的m RNA表达高于正常结肠上皮细胞（P＜0.05）。细胞功能实验结果显示,结直肠癌细胞株TM4SF5敲低组（TM4SF5-sh）和对照组（NC）之间的细胞生物学功能有显著差异（P＜0.05）。结论:结直肠癌中高表达的TM4SF5与结直肠癌不良预后有关,并且下调TM4SF5抑制结直肠癌增殖能力、侵袭能力并且改变细胞周期分布。
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