【摘 要】
:
艾纳香油(BBO)是从药用植物艾纳香(Blumea balsamifera(L.)DC.)中提取获得的挥发油,前期研究表明其具有良好的抗金黄色葡萄球菌(S.aureus)活性,能够破坏细胞壁结构,但其如何影响细胞壁、作用靶点和物质基础是什么仍未见报道。因此,本文探讨BBO对S.aureus细胞壁膜结构及生理的影响,寻找BBO影响细胞壁的作用靶点以及筛选BBO中的抗菌活性物质及其可能的作用机制。本研
论文部分内容阅读
艾纳香油(BBO)是从药用植物艾纳香(Blumea balsamifera(L.)DC.)中提取获得的挥发油,前期研究表明其具有良好的抗金黄色葡萄球菌(S.aureus)活性,能够破坏细胞壁结构,但其如何影响细胞壁、作用靶点和物质基础是什么仍未见报道。因此,本文探讨BBO对S.aureus细胞壁膜结构及生理的影响,寻找BBO影响细胞壁的作用靶点以及筛选BBO中的抗菌活性物质及其可能的作用机制。本研究首先采用烃类化合物吸附法(BATH)检测S.aureus细胞表面疏水性(CSH),采用光度法检测培养液中碱性磷酸酶(AKP)、β-半乳糖苷酶、K+、Mg2+的含量,并提取检测细胞肽聚糖(PG)以及观察细胞聚集情况,评价BBO对细胞壁和细胞膜的影响。其次采用TMT定量蛋白质组学技术分析BBO对S.aureus蛋白质组的影响,通过GO富集分析、KEGG通路分析、蛋白互作网络分析,筛选表达水平显著差异以及功能上对细菌生长至关重要的蛋白质采用RT-q PCR进行验证。接下来选择与细胞壁合成相关且表达显著差异的磷酸N-乙酰胞壁酰基五肽转移酶(Mra Y)和甘氨酸-甘氨酸内肽酶(Lyt M)作为靶点,从PDB数据库获取Lyt M的3D结构,采用同源建模方法获取Mra Y的3D结构并利用拉氏图、PROSA和ERRAT对此结构的可靠性进行评估,然后利用分子对接技术将BBO中的化合物与Mra Y、Lyt M进行对接打分,根据打分结果选择打分较高的化合物。采用二倍稀释法检测打分较高的化合物对S.aureus最小抑菌浓度(MIC),采用气相色谱(GC)法检测活性物质在BBO中的含量,RT-q PCR检测活性物质对S.aureus的mra Y和lyt M m RNA表达的影响,研究活性物质对S.aureus生长曲线、细胞膜通透性的影响,利用扫描电镜观察活性物质对S.aureus细胞形态的影响。结果表明BBO能够极显著增大S.aureus细胞壁CSH(P<0.01),且具有浓度依赖性;观察到BBO能引起液体培养基下的S.aureus发生聚集;能够显著降低S.aureus细胞PG含量(P<0.05);能增加AKP的量,但差异不显著(P>0.05);较高浓度BBO能在较短时间内破坏细胞膜通透性导致β-半乳糖苷酶大量泄漏,而较低浓度BBO破坏细胞膜通透性的作用时间较长,β-半乳糖苷酶的泄漏量随时间延长而增多;BBO能极显著增加培养液中K+,Mg2+浓度(P<0.01)。蛋白质组学结果表明,BBO作用S.aureus后有187个蛋白的表达量显著上调(P<0.05),214个蛋白的表达量显著下调(P<0.05),这些蛋白参与了细菌氨基酸代谢、物质转运、细胞壁、细胞膜、转录、翻译、毒力等多种生物学过程,其中与氨基酸代谢相关的有:鸟氨酸氨基甲酰基转移酶、精氨酸脱亚胺酶等;与核糖体相关的有:50S核糖体蛋白L5、L13、L33,30S核糖体蛋白S7、S16、S20等;与细胞壁相关的有:Mra Y、Lyt M、d-丙氨酸-d-丙氨酸连接酶、D-丙氨酰载体蛋白等。以Lyt M和Mra Y作为靶点利用分子对接筛选出化合物蓝桉醇和长叶烯,其MIC值分别为7.81μg/m L和78.12μg/m L,它们在BBO中的含量分别为0.15%和0.14%,它们能够显著降低mra Y m RNA的表达,显著增加lyt M m RNA的表达(P<0.05),显著促进细胞集聚(P<0.05),显著增强细胞膜通透性(P<0.05),破坏细胞形态使细胞发生破孔褶皱破碎,从而达到抑制细菌生长的作用。结果提示,BBO通过增大细胞壁CSH,不利于微生物进行代谢,促进细胞聚集,导致细菌无法摄取生长所需的营养物质而不能繁殖,降低细胞PG含量,破坏细胞膜及细胞壁完整性,影响S.aureus氨基酸代谢、物质转运、细胞壁、细胞膜、转录、翻译、毒力等多种过程。蓝桉醇和长叶烯是BBO中抗S.aureus的活性成分,能够影响mra Y和lyt M的m RNA表达,靶向Lyt M,Mra Y影响细胞壁的合成,促进细胞集聚,增强细胞膜通透性,破坏细胞形态使细胞发生破孔褶皱破碎从而发挥抗菌作用。这些将为进一步研究艾纳香油BBO抗菌机制和抗菌活性物质奠定了基础,有利于艾纳香的开发利用。
其他文献
目的:制定并探讨意识障碍恢复期康复临床路径的实施效果。方法:意识障碍患者112例随机分为路径组(n=59),对照组(n=53)。路径组按照意识障碍恢复期康复临床路径方案诊疗,对照组按照常规方案诊疗。观察两组患者干预前后的行为学评分、意识状态等级改善状况、并发症发生率及日均住院费用等指标。结果:治疗后,两组患者行为学评分、意识状态等级改善率和觉醒率等指标较治疗前均有提高(P<0.05),且路径组优于
SHP2是目前唯一被证实的原癌蛋白,参与调控多个癌症相关过程。目前对SHP2小分子抑制剂进行了大量的研发,主要分为催化位点抑制剂和变构抑制剂。由于PTP催化结构域的高度保守序列和带正电荷的性质,开发成药性好的SHP2催化位点抑制剂仍然非常困难。变构抑制剂是一种通过非催化位点选择性靶向SHP2的新方法。目前已报道的SHP2变构位点有4个,针对变构位点1的抑制剂研究较多,而作用于变构位点2的抑制剂目前
随着移动互联网和移动通信设备的蓬勃发展,海量描述运动物体时空信息的轨迹数据能够被实时迅速采集。轨迹数据分析在探索人类活动和行为模式等方面发挥着重要作用,因此吸引了学术界的广泛关注。交通拥堵监控是智慧城市建设的重要一环,而实时交通拥堵监测是实时轨迹数据流分析的应用之一。现有的以图像处理或以统计实时车辆等快照式的交通拥堵监测难以检测出在时间维度上的拥堵持续状况,交通的持续拥堵监测对于交通管控具有重要意
目的:探讨前庭刺激联合标准化体位变换治疗重型颅脑损伤后严重意识障碍患者的临床效果。方法:选取南阳市中心医院2021年7月至2022年5月期间收治的62例重型颅脑损伤患者,按照患者入院先后顺序将其分为对照组与观察组,各31例。对照组患者在院期间给予常规对症康复治疗,而观察组在此基础上给予前庭刺激联合标准化体位变换治疗,比较两组患者治疗效果、昏迷程度[格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分]、意识状态[昏迷恢
环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)的结合蛋白(CBP)组成的p300/CBP家族是组蛋白乙酰转移酶(HAT)家族主要成员之一,参与细胞周期进展和细胞的生长、分化和发展,是一类非常重要的辅激活因子,可以调节多种关键转录调节因子的功能,与肿瘤的发生密切相关。因此,CBP及其抑制剂越来越受到研究者的关注。本研究以PF-CBP1为先导化合物,以吡咯并[2,3-c]吡啶为母核设计并合成了31个结构新颖的
内生真菌因特殊的生态位,具有产结构新颖、活性优越的抗肿瘤活性物质的潜力,是筛选新型抗肿瘤药物的理想对像。然而,植物内生真菌产活性化合物含量极低且稳定性差。全局调控因子VeA保守调控丝状真菌次级代谢产物的生物合成,课题组前期从药用植物马比木的根部分离获得了一株编号为TRG1_5的内生镰刀菌,其粗提物对肿瘤细胞A549具有较好的抑制作用。本研究以该菌株为研究对象,探究了全局调控因子VeA对该菌株的生物
随着经济与科技的发展,各行各业的产品更加多样化,其产品包装也呈现出不同风格,能够给消费者提供多样的消费体验。由于纸质材料具有经济实惠、加工方便、绿色环保、可塑造性强等优点,再加上大众环保意识的不断提高,纸质材料在产品包装设计中的应用更加广泛。文章主要从纸质材料在产品包装设计中的应用意义、应用原则以及应用发展趋势3个方面进行具体分析。
微米级和纳米级的金属线栅因其高导电性和延展性,被广泛用作柔性透明电极。近几年,多种金属线栅薄膜均被证明有良好的声学特性。目前,热声扬声器的主要制作材料为石墨烯和碳纳米管,但石墨烯薄膜面积普遍较小,而碳纳米管薄膜保存困难,极易损坏。相比之下,金属线栅可制备边长达上百厘米的薄膜,且制造成本较低,其电阻小,强度高,可任意弯曲折叠,对保存条件要求较低,更适合制作柔性透明热声扬声器。本文在国家自然科学基金面
信号传递的起始、增殖和终止控制着众多正常的细胞过程,这一过程由信号蛋白中酪氨酸的磷酸化状态决定,其中牵涉着蛋白质酪氨酸激酶和酪氨酸磷酸酶两大酶类。人体的各个系统的细胞几乎处于动态平衡,当部分正常细胞在致瘤因素作用下出现异常从而打破细胞调控的稳定状态形成肿瘤。SHP2(PTPN11基因编码)是PTP家族成员,包含两个Src同源结构域和一个PTP催化域。当其被过度活化可刺激多条信号通路,如PD-1/P
目的 探讨无创电/磁刺激治疗慢性意识障碍的效果。方法 回顾性分析2019年6月~2021年9月无创电/磁刺激治疗的144例慢性意识障碍的临床资料。常规对症治疗36例(对照组),正中神经电刺激(MNS)治疗36例(MNS组),重复经颅磁刺激(rTMS)治疗36例(rTMS组),MNS联合rTMS治疗36例(MNS+rTMS组)。应用昏迷恢复量表(CRS-R)评估疗效。结果 治疗2周、1个月,无创神经