双氢青蒿素（DHA）是青蒿素C-10位羰基经四氢硼钠还原为羟基制得的抗疟药物,抗疟活性是青蒿素的8～10倍。现代药理学研究表明,双氢青蒿素除了具有抗疟作用以外,还具有抗肿瘤、抗炎以及免疫抑制等药理活性,具有潜在的临床应用前景。杂质是指药品中任何影响其纯度的物质,可以分为有机杂质、无机杂质和残留杂质,其中有机杂质一般为工艺中引入的杂质和降解产物等,由于这类杂质的化学结构通常与活性成分类似或具渊源关系,因此有机杂质又被称为有关物质。根据国内外的文献报道,双氢青蒿素原料及其片剂中存在的主要有关物质为2-[-4甲基-2-氧代-3-（3-氧代丁基）]环己基丙醛（DKA）,2015版《中国药典》第二部中收载了双氢青蒿素原料、双氢青蒿素片剂和双氢青蒿素哌喹片。在2010年及以前的《中国药典》中,双氢青蒿素原料及其片剂均采用薄层色谱法（TLC）检测有关物质,2015版《中国药典》采用主成分自身对照的高效液相色谱法（HPLC）测定有关物质含量,但未按《化学药物杂质研究的技术指导原则》对超过鉴定限度和质控限度的有关物质进行定性鉴别和制订含量限度标准。因此,开展双氢青蒿素原料及其片剂中有关物质研究,对完善该药质量标准、保障用药安全具有重要意义。本文主要从DKA对照品制备和建立双氢青蒿素原料及其片剂中DKA含量测定方法两个方面进行研究。1.文献综述本文综述了药物有关物质的研究概况,总结了青蒿素类药物（青蒿素、双氢青蒿素、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿琥酯）的有关物质及其测定方法,以及该类药物在酸、碱、高温、氧化、光照等条件的下降解产物。2.DKA对照品研究双氢青蒿素在无水溴化亚铁作用下转化得到DKA,经硅胶柱层析分离纯化,制得DKA对照品（纯度≥95%）;建立了 DKA的含量检测方法,并对DKA的稳定性进行了研究。共制备DKA对照品22批次,DKA反应得率约为50%,并制备了 DKA对照品30 g用于安全性评价。3.双氢青蒿素原料及其片剂中DKA含量测定建立了 DKA的外标法和加校正因子的主成分对照品外标法的HPLC含量检测方法,并对不同批次的双氢青蒿素原料及其片剂中的DKA含量进行了测定。外标法采用色谱柱为 Agilent Eclise XDB-C18 柱（4.6 mm × 250 mm,5 μm）,流动相为乙腈:水（37:63）,流速为1.0mL/min,柱温为15℃,检测波长为216nm,进样体积为40 μL。经方法学验证,该方法专属性强,线性及分离度良好,精密度、重复性、稳定性和加样回收率均符合《药品质量标准分析方法验证指导原则》的要求,用所建立方法对13批次双氢青蒿素原料和10批次双氢青蒿素片剂进行了测定。加校正因子的主成分对照品外标法采用色谱柱为Agilent Eclise XDB-C18柱（4.6 mm × 250 mm,5 μm）,流动相为乙腈:水（37:63）,流速为 1.0 mL/min,柱温为15℃,检测波长为216nm,进样体积为20μL。经方法学验证,该方法专属性强,线性及分离度良好,精密度、重复性、稳定性和加样回收率均符合《药品质量标准分析方法验证指导原则》的要求。三根不同色谱柱测定DKA与双氢青蒿素的校正因子均值为0.256。用所建立的方法对5批次双氢青蒿素原料和5批次片剂进行了测定,并以外标法对校正因子准确性进行验证,结果表明,加校正因子的主成分对照品外标法与外标法测定双氢青蒿素原料及片剂中DKA含量一致。综上所述,本文采用化学合成的方法制备了 DKA对照品（纯度≥95%）,建立了外标法和加校正因子的主成分对照品外标法测定双氢青蒿素原料及其片剂中DKA含量的HPLC方法,经方法学验证,两种方法均准确、可靠,可用于双氢青蒿素原料及其片剂中DKA的质量控制。该研究对完善双氢青蒿素原料及其片剂质量标准,保障药品安全性具有重要意义。