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目的:通过实验研究深低温冷冻不同复温方法下兔肢体再植后血管形态学变化,找出一种对复合组织中血管损伤最小的复温方法,从而为深低温处理后断肢再植可行性提供理论依据。方法:取健康新西兰大白兔30只,随机分为空白对照组(A组)、慢速冷冻-慢速复温组(B组)、慢速冷冻-快速复温组(C组)。均给予大白兔右后肢自膝上1cm处离断。A组不进行任何处理,所有深低温处理组均给予冻存保护剂灌注和保护。慢速冷冻慢速复温组采用梯度化冷冻复温处理断肢,慢速冷冻快速复温组采用梯度化冷冻断肢后直接放入37℃水浴快速复温。B组、C组复温后均行断肢再植,再植肢体成活6小时后给予再次离断右后下肢。A、B、C三组兔断肢均取股血管组织采用染色光镜及电镜进行形态学观察及大体观察,光镜病理计分结果用统计学分析。结果:(1)大体观察:B组血管较冷冻-复温处理前管径略增粗,管壁结构完整,无分层及血栓形成,通血后肢体轻度水肿,末梢血运良好;C组2例血管结构紊乱,管腔塌陷,修剪外膜后管壁结构欠佳,未能完成再植,3例出现管腔分层现象,余血管均较冷冻-复温处理前管径增粗,管壁结构尚完整,无分层及血栓形成,通血后肢体水肿明显,末梢血运尚可。(2)光镜下形态学检测结果:A组:内皮细胞连续性好,排列规则有序,内皮下层内弹力膜结构正常,中层平滑肌细胞核清晰,结构正常,个别出现内皮细胞点状脱落,余结构正常;B组:内皮细胞存在少量脱失,部分内皮细胞排列欠规则,偶见内弹力膜断裂,平滑肌细胞结构良好,血管整体结构良好;C组:内皮细胞片状脱落,内皮层与内皮下层可见多处空隙,内弹力膜、中层平滑肌偶见断裂,管壁结构欠佳。(3)透射电镜观察内皮细胞结果:A组:内皮细胞结构完好,细胞器形态良好,细胞核结构清晰,无皱缩,细胞连接完好,与弹力内膜附着紧密;B组:内皮细胞结构欠佳,细胞皱缩,细胞器结构紊乱,少部分空泡化,细胞间连接消失,与内弹力膜间产生空隙,部分脱离,甚至脱落至管腔内;C组:内皮细胞大量脱落,结构欠完整,内弹力膜连续性欠完整,线粒体肿胀,嵴消失,部分空泡化。结论:1.复合组织经梯度降温复温后血管内皮活性不同程度损伤;2.慢速冷冻-慢速复温较慢速冷冻-快速复温对血管组织影响小,保存效果好。