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抗生素相关性腹泻(antibiotic-associated diarrhea,AAD)是指应用抗生素后导致肠道菌群失调而引起的最常见的病症。AAD的发生主要与肠道菌群失调,机体免疫功能障碍及水液代谢失调密切相关。氟苯尼考作为一种广泛使用的饲用抗生素,腹泻是其滥用导致的常见病症之一。补脾益气、利水除湿等功能的中药具有改善肠道菌群紊乱,提高机体免疫和调节水湿代谢的作用,对腹泻具有显著的疗效。研究表明,TLR4/NF-κB通路参与调控肠道免疫和屏障功能,AQP4与肠道水液转运密切相关。本试验旨在研究氟苯尼考致腹泻的肉鸡肠道中TLR4/NF-κB通路相关因子和AQP4的变化及复方中药对氟苯尼考致肉鸡腹泻的有效防治机理。方法:303羽1日龄罗斯肉鸡在试验前适应性饲养1周(饲料为基础饲料),剔除病弱鸡并随机分为五组,各组肉鸡数量为55只。空白组;氟苯尼考组(饮水添加100 mg/kg?bw?d氟苯尼考);复方中药高剂量组(饲喂同氟苯尼考组+饮水添加2 g/kg?bw?d复方中药);复方中药低剂量组(饲喂同氟苯尼考组+饮水添加1g/kg?bw?d复方中药中药组),L-精氨酸组(饲喂同氟苯尼考组+日粮添加1%L-Arg)。分别于肉鸡15、25、35及45日龄时,称重,颈动脉放血处死,观察病理变化,迅速剖取脾脏、胸腺并称重,测定脏器指数。十二指肠、空肠、回肠中段取两份约1cm大小组织,一份固定于bouins中,用于肠道形态学检测;另一份迅速放入液氮中,再转入-80℃冰箱中长久保存,荧光定量PCR检测TLR4、My D88、NF-κB、TNF-α及AQP4 m RNA相对表达量。结果:1、试验期间,与空白组相比,氟苯尼考组肉鸡精神不振,羽毛蓬乱,采食量减少,饮水量增加,肛门周围有黄白色或淡绿色粪便残留,排水样稀便;剖检可观察到肠道大部分出现肿大、充血甚至出血的状况,肠壁变薄,呈半透明状,肠内容物稀释,有的腹腔还可见酸臭样积液。与氟苯尼考组相比,各复方中药与L-精氨酸组肉鸡以上临床症状均有明显改善。2、与空白组相比,氟苯尼考组8～15、16～25、26～35及36～45日龄肉鸡腹泻率极显著上升(P<0.01);与氟苯尼考组相比,复方中药高剂量组8～15、16～25、26～35及36～45日龄肉鸡腹泻率显著下降(P<0.01或P<0.05),复方中药低剂量、L-精氨酸组16～25、26～35、36～45日龄肉鸡腹泻率极显著下降(P<0.01)。3、与空白组相比较,氟苯尼考组15、25、35及45日龄肉鸡体重、胸腺指数和脾脏指数显著下降(P<0.01或P<0.05);与氟苯尼考组相比较,复方中药高、低剂量组15、25、35及45日龄肉鸡体重、胸腺指数和脾脏指数显著上升(P<0.01或P<0.05),L-精氨酸组25、35、45日龄肉鸡体重显著上升(P<0.05),35、45日龄肉鸡脾脏指数、胸腺指数显著上升(P<0.01或P<0.05)。4、与空白相比,氟苯尼考组15、25、35及45日龄肉鸡十二指肠、空肠、回肠TLR4、My D88、NF-κB、TNF-αm RNA相对表达量都有不同程度的上升,有的表现出显著性(P<0.01或P<0.05);与氟苯尼考组相比,复方中药高、低剂量及L-精氨酸组15、25、35及45日龄肉鸡十二指肠、空肠、回肠TLR4、My D88、NF-κB、TNF-αm RNA相对表达量都有不同程度的下降,有的表现出显著性(P<0.01或P<0.05)。5、与空白组相比,氟苯尼考组15、35日龄肉鸡十二指肠、空肠、回肠AQP4m RNA相对表达量极显著下降(P<0.01);与氟苯尼考组相比,复方中药高、低剂量组15、35日龄肉鸡十二指肠、空肠、回肠AQP4 m RNA相对表达量显著上升(P<0.01或P<0.05),L-精氨酸组35日龄十二指肠、空肠、回肠AQP4 m RNA相对表达量显著上升(P<0.01或P<0.05)。结论1、氟苯尼考诱发腹泻时,免疫器官指数显著下降,肠道中TLR4/NF-κB通路相关基因TLR4、My D88、NF-κB、TNF-αm RNA相对表达量显著上升,AQP4m RNA相对表达量显著下降,说明TLR4/NF-κB通路通过调控免疫及水液代谢相关因子,促进肠黏膜的损伤来参与氟苯尼考致腹泻的发生发展。2、补脾益气、利水除湿等功能的复方中药和L-精氨酸有效提高免疫器官指数,下调小肠中TLR4、My D88、NF-κB、TNF-αm RNA相对表达量,上调AQP4m RNA相对表达量显著上升,表明复方中药和L-精氨酸可以调节机体的免疫及水液代谢功能来有效防治氟苯尼考诱发腹泻。