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金纳米颗粒具有低毒,广谱抗菌性,但其抗菌效果低,使得单纯的金纳米颗粒在抗菌应用方面受到极大的限制。为提高其抗菌效果,同时利用其低毒、广谱抗菌性能和不易产生耐药性等特性,本研究以金纳米颗粒(AuNPs)为模型纳米材料,手性半胱氨酸(D/L-Cys)为手性信号物质,构建手性半胱氨酸金纳米颗粒(D/L-AuNPs),研究其在体内体外的抗菌特性,探讨其抗菌机理和生物安全性。以其为手性纳米材料在新型抗菌剂开发和研究中提供理论依据。
1.D/L-Cys的抗菌性能研究。不同浓度D/L-Cys对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、肠炎沙门氏菌的抑菌性能和抑菌生长曲线的实验结果表明,D-Cys对四种菌有广谱抗菌性能,L-Cys只对金黄色葡萄球菌表现出选择性抗菌活性;对于大肠杆菌而言,12mg/mLD/L-Cys对其抑菌率分别为92%和60%,存在显著差异抑菌;相同浓度的D/L-Cys对金黄色葡萄球菌抑菌率分别为90%和92%,抑菌差异不明显;钾离子泄露实验、PI染色和TEM结果可以看出D-Cys对大肠杆菌细胞膜破坏更严重。
2.D/L-AuNPs对大肠杆菌抗菌性能和机理研究。3mg/mLD/L-AuNPs对大肠杆菌抑菌率分别可达到96.6%和65.4%。说明D/L-AuNPs可以显著提高D/L-Cys的抑菌性能。D/L-AuNPs对大肠杆菌细胞膜结构、显微结构以及内容物泄露的研究结果表明,D-AuNPs对细胞膜的破坏程度大于L-AuNPs,导致胞内物质泄露严重;扫描电子显微镜结果显示,大量的D-AuNPs与多糖吸附在细胞膜表面,菌体表面出现孔洞,细菌死亡严重;透射电子显微镜结果显示,D-AuNPs处理之后大部分细胞壁膜破裂,胞质内细胞器破碎,细胞内部正常代谢必需物质消失耗尽,菌体死亡严重。
3.D/L-AuNPs体内抑菌性能及对肠道微生物的影响:以经口灌胃的施药方式治疗肠道感染小鼠,D-AuNPs能降低小鼠肠道组织中90%的大肠杆菌,表现出高效的体内抗菌活性,肠炎症状减轻;同时对受损的小肠绒毛有一定的修复作用。D-AuNPs组相比卡那霉素治疗组对小鼠肠道微生物菌群多样性、菌群结构组成以及物种丰度的变化不大。
1.D/L-Cys的抗菌性能研究。不同浓度D/L-Cys对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、肠炎沙门氏菌的抑菌性能和抑菌生长曲线的实验结果表明,D-Cys对四种菌有广谱抗菌性能,L-Cys只对金黄色葡萄球菌表现出选择性抗菌活性;对于大肠杆菌而言,12mg/mLD/L-Cys对其抑菌率分别为92%和60%,存在显著差异抑菌;相同浓度的D/L-Cys对金黄色葡萄球菌抑菌率分别为90%和92%,抑菌差异不明显;钾离子泄露实验、PI染色和TEM结果可以看出D-Cys对大肠杆菌细胞膜破坏更严重。
2.D/L-AuNPs对大肠杆菌抗菌性能和机理研究。3mg/mLD/L-AuNPs对大肠杆菌抑菌率分别可达到96.6%和65.4%。说明D/L-AuNPs可以显著提高D/L-Cys的抑菌性能。D/L-AuNPs对大肠杆菌细胞膜结构、显微结构以及内容物泄露的研究结果表明,D-AuNPs对细胞膜的破坏程度大于L-AuNPs,导致胞内物质泄露严重;扫描电子显微镜结果显示,大量的D-AuNPs与多糖吸附在细胞膜表面,菌体表面出现孔洞,细菌死亡严重;透射电子显微镜结果显示,D-AuNPs处理之后大部分细胞壁膜破裂,胞质内细胞器破碎,细胞内部正常代谢必需物质消失耗尽,菌体死亡严重。
3.D/L-AuNPs体内抑菌性能及对肠道微生物的影响:以经口灌胃的施药方式治疗肠道感染小鼠,D-AuNPs能降低小鼠肠道组织中90%的大肠杆菌,表现出高效的体内抗菌活性,肠炎症状减轻;同时对受损的小肠绒毛有一定的修复作用。D-AuNPs组相比卡那霉素治疗组对小鼠肠道微生物菌群多样性、菌群结构组成以及物种丰度的变化不大。