干涉MYBS2基因对杨树生长、抗旱及抗盐性的影响

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植物遭受干旱和盐胁迫伤害时会诱导一系列生物反应的发生。MYB转录因子参与植物次生代谢和非生物胁迫应答等过程,1R-MYB类亚家族在植物非生物胁迫耐受性方面起着重要作用。本研究应用RNAi技术研究降低MYBS2基因表达对杨树生长、抗旱和抗盐性的影响,取得如下结果:(1)系统发育树构建及顺式作用元件预测结果显示:杨树MYBS2和麻风树MYBS2的亲缘关系较近,表明杨树和麻风树的MYBS2基因可能具有相似的功能;杨树MYBS2基因启动子区域中存在光、低温、脱落酸、赤霉素响应等顺式作用元件,表明MYBS2基因可能参与杨树的生长发育及胁迫响应过程。(2)野生型杨树不同组织的实时荧光定量PCR检测结果显示:杨树根中MYBS2基因的表达量最高,侧芽次之,茎和成熟叶较低,嫩叶和顶芽几乎不表达,表明MYBS2基因可能对根和侧芽的生长发育起重要作用。(3)农艺性状测定结果显示:降低MYBS2基因的表达后,RNAi转基因杨树生长后期的株高、茎围和分枝数均超过野生型植株,表明MYBS2基因在杨树的生长过程中可能发挥负调控因子的作用。(4)RNAi转基因杨树25%PEG6000和150mM NaCl处理下的表型观察和生理生化指标测定结果显示:干旱胁迫、盐胁迫20 d后,RNAi转基因杨树生长状态比野生型杨树植株好,叶片萎蔫程度较轻,且干旱胁迫条件下,RNAi转基因杨树株系Ri-2、Ri-3的株高生长较野生型植株更快。表明MYBS2基因可能作为负调控因子在杨树干旱和盐胁迫响应过程中发挥作用。在干旱和盐胁迫条件下,Ri-2、Ri-3和Ri-4株系叶片的超氧化物歧化酶活性,Ri-2、Ri-4和Ri-5株系叶片的过氧化物酶活性,Ri-2、Ri-4、Ri-5株系叶片的可溶性糖含量,Ri-2、Ri-3、Ri-4和Ri-5株系叶片的可溶性蛋白含量均升高,Ri-2、Ri-3和Ri-4株系叶片的丙二醛含量也升高,但增幅较小,表明其具有一定的抗氧化能力和渗透能力。以上结果总体说明RNAi转基因杨树的MYBS2基因可能作为负调控因子在杨树干旱和盐胁迫响应过程中发挥作用。(5)RNAi转基因杨树25%PEG6000和150mM NaCl处理下的Real-time PCR检测结果显示:在干旱胁迫和盐胁条件下,RNAi转基因杨树植株根、茎、叶中MYBS2基因的表达均下调,表明MYBS2基因的表达受到了抑制。综上所述,通过抑制杨树MYBS2基因的表达可以促进杨树的生长,提高杨树对干旱、盐胁迫的耐受能力。表明杨树MYBS2基因在植物生长发育和胁迫响应过程中可能发挥负调控因子作用,但是具体调节机制有待后续进一步的探究。
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