【摘 要】
:
本试验将鸡病毒性关节炎病毒(AVAV)内蒙古、天津地区分离株(B-98,C-98,G-98,T-98株)经SPF鸡胚增殖活化,进行总RNA的提取。参考GeneBank中ARV-S1133株S1基因序列设计一对测序
论文部分内容阅读
本试验将鸡病毒性关节炎病毒(AVAV)内蒙古、天津地区分离株(B-98,C-98,G-98,T-98株)经SPF鸡胚增殖活化,进行总RNA的提取。参考GeneBank中ARV-S1133株S1基因序列设计一对测序引物,一对诊断引物。应用测序引物进行RT-PCR特异性地扩增病毒的S1基因。将S1基因cDNA克隆到pGEM-TEasy载体后进行测序。测序结果表明所扩增的cDNA片段长1643个核苷酸,包含了完整的S1基因的三个开放阅读框架(ORF1,ORF2和ORF3)和基因两端的非编码区,ORF1,ORF2和ORF3分别编码P10、P17和σ3蛋白。核苷酸序列比较分析结果表明:4株AVAV分离株之间在P10和P17蛋白基因上均没有核苷酸差异,在σ3蛋白基因上也只存在3个核苷酸差异;4株AVAV分离株与其它参考毒株除ARV-138和纳尔逊海湾病毒(Nelson Bay Virus,NBV)外,同源性都在95%以上。表明,鸡病毒性关节炎病毒我国分离株在S1基因上与参考毒株有很大的相关性。应用诊断引物一步法RT-PCR扩增病毒RNA,以建立RT-PCR诊断方法,同时检测其特异性和敏感性。特异性试验和敏感性试验结果表明,所建立的一步法RT-PCR方法可以检测到经鸡胚增殖的病毒标准株ARV–S11 33及地方分离株(B-98,C-98,G-98,T-98)的核酸,在琼脂糖凝胶电泳中出现了与预期大小一致的435bp的DNA片段,而其他对照病原(NDV,IBDV,IBV,ILTV,EDS76V)的检测结果均为阴性;该RT-PCR的最低检测量为0.5ng的ARV RNA,说明此方法对于禽呼肠孤病毒的检测是特异、敏感的。
其他文献
随着中国改革开放步伐的加快及日益与国际经济秩序接轨,在全球一体化的背景下,外商在华投资有了很大发展,外国直接投资作为我国吸引外资的主要形式大量涌入,它对我国对外贸易
本文利用快速凝固技术和传统铸造技术分别制备出了成分相同的Cu68.5Ni15.7P6.5Sn9.3(wt%)非晶钎料和普通钎料,采用XRD、DTA、SEM、EDS等多种现代测试手段及拉伸试验,对比研究了
察合台的卒年为1242年,很可能是在1242年的年中,比窝阔台晚去世七个月。察合台卒年的确定有助于厘清14世纪史学巨著《史集》各主要抄本编写、修订的先后关系。察合台的驻地忽
随着经济与科技的不断发展,信息技术的发展可谓日新月异。计算机电子工程技术在日常生产生活中的应用愈发频繁和广泛,并且不断深入到人们生产生活的各个角落。计算机电子工程
合欢花为Albizzia Julibrissin Durazz的干燥花序,是常用中药,具有解郁安神之功效。其安神作用与合欢皮相似,但其理气解郁作用优于合欢皮,一些具有解郁的方剂如“解郁合欢汤
雷沛鸿是我国现代教育史上一位伟大的民众教育家,他的思想与实践不仅独步一时,而且卓有建树。他认为民众教育的对象是把教育从少数人所独享普及到所有的人;把教育从人生的一定阶
20世纪90年代苏联解体,在此后十多年来的迅速的社会转型的进程中,俄罗斯社会的各个领域都发生了重大的变化。中小学校德育同样也在经历着社会转型所生成的各种矛盾、冲突以及重
随着桥梁结构理论的不断发展以及计算机应用技术的日益成熟,大跨径桥梁的建设在日益增多,斜拉桥以其刚劲的外观和超大的跨度成为人们首选的对象。由于斜拉桥是一种高次超静定
本文叙述了水热氢还原制备镍包金刚石的原理及过程,讨论了影响得到包覆完整均匀的镍包金刚石的主要因素(如金刚石的表面预处理、搅拌强度、反应温度等)。SEM分析结果表明,一
蜜饯是我国的传统食品,因其生产加工方法仍以传统的手工为主,半机械化生产,微生物污染及其所带来危害不可忽视。蜜饯的微生物性危害可用 HACCP 系统进行评价,该系统包括:(1)