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目的:探讨急性后循环缺血对豚鼠蜗神经核能量代谢、SIRT1-PINK1介导的线粒体自噬的影响,以及电针对急性后循环缺血豚鼠蜗神经核能量代谢功能重塑的影响及机制。
方法:1、动物分组:40只健康杂色豚鼠(3月龄)随机分为四组,分别为:手术组、对照组、手术+电针组(简称电针组)和假手术组,每组各10只。手术组:手术离断豚鼠右侧颈总动脉、结扎右侧锁骨下动脉;电针组:与手术组同样处理后,术后连续一周,以30min/次/天的频率,电针百会穴和内关穴;假手术组:手术暴露右侧颈总动脉、右侧锁骨下动脉,但不做离断和结扎;对照组:自然喂养。2、采用Micro PET/CT检测左右两侧蜗神经核摄取18F-FDG的情况,以SUVmax左/右的平均比值分析各组蜗神经核葡萄糖代谢的差异。3、采用ELISA方法检测各组右侧蜗神经核的ATP生成水平。4、采用实时定量PCR方法检测右侧蜗神经核中PINK1、SIRT1、LC3mRNA的表达变化。5、统计学方法:数据表示为均数±标准差(-x±s),分析应用单因素方差分析(One-way ANOVA),以P<0.05时表示数据具有统计学差异。LSD法应用于方差齐时的组间数据比较,Tamhane’s T2检验应用于方差不齐时的组间数据比较。
结果:1、蜗神经核葡萄糖代谢功能变化:对照组、假手术组、手术组和电针组左右两侧蜗神经核SUVmax左/右平均比值相比有统计学的差异(F=18.757,P=0.000)。与对照组相比,电针组、手术组的SUVmax平均比值增高(P电针组=0.002,P手术组=0.000),假手术组的平均比值无明显差异(P=0.228);与假手术组比较,电针组、手术组的SUVmax平均比值增高(P电针组=0.028,P手术组=0.000);与手术组比较,电针组平均比值降低(P=0.002);2、右侧蜗神经核ATP水平变化情况:四组右侧蜗神经核的ATP水平差异有统计学意义(F=369.129,P=0.000)。与对照组相比,手术组、假手术组和电针组右侧蜗神经核ATP水平降低(P手术组=0.000,P假手术组=0.000,P电针组=0.000);与假手术组比较,手术组、电针组右侧蜗神经核ATP水平降低(P手术组=0.000,P电针组=0.000);与手术组相比,电针组蜗神经核ATP水平升高(P=0.000);3、蜗神经核PINK1、SIRT1和LC3mRNA表达变化:四组豚鼠蜗神经核PINK1mRNA相对表达差异无统计学意义(F=1.192,P=0.327);LC3mRNA相对表达差异无统计学意义(F=0.762,P=0.523);SIRT1mRNA相对表达差异有统计学意义(F=3.374,P=0.029)。与对照组和假手术组比较,手术组SIRT1mRNA表达增高(P对照组=0.004,P假手术组=0.049);与手术组比较,电针组SIRT1mRNA表达降低(P电针组=0.033)。与假手术组、对照组相比,电针组SIRT1mRNA表达差异无统计学意义(P对照组=0.406,P假手术组=0.856);对照组与假手术组比较,SIRT1mRNA表达差异无统计学意义(P=0.313)。
结论:1、急性后循环缺血豚鼠蜗神经核葡萄糖代谢功能降低、ATP生成水平降低。2、SIRT1可能参与了急性后循环缺血豚鼠蜗神经核能量代谢的重塑过程。3、电针百会穴和内关穴可以改善急性后循环缺血豚鼠蜗神经核葡萄糖代谢功能,提高ATP生成水平。4、电针百会穴和内关穴可能通过调节SIRT1的表达促进急性后循环缺血豚鼠蜗神经核能量代谢功能的重塑。5、SIRT1-PINK1介导的线粒体自噬在急性后循环缺血豚鼠蜗神经核能量代谢功能重塑过程中的作用还需要进一步研究证实。
方法:1、动物分组:40只健康杂色豚鼠(3月龄)随机分为四组,分别为:手术组、对照组、手术+电针组(简称电针组)和假手术组,每组各10只。手术组:手术离断豚鼠右侧颈总动脉、结扎右侧锁骨下动脉;电针组:与手术组同样处理后,术后连续一周,以30min/次/天的频率,电针百会穴和内关穴;假手术组:手术暴露右侧颈总动脉、右侧锁骨下动脉,但不做离断和结扎;对照组:自然喂养。2、采用Micro PET/CT检测左右两侧蜗神经核摄取18F-FDG的情况,以SUVmax左/右的平均比值分析各组蜗神经核葡萄糖代谢的差异。3、采用ELISA方法检测各组右侧蜗神经核的ATP生成水平。4、采用实时定量PCR方法检测右侧蜗神经核中PINK1、SIRT1、LC3mRNA的表达变化。5、统计学方法:数据表示为均数±标准差(-x±s),分析应用单因素方差分析(One-way ANOVA),以P<0.05时表示数据具有统计学差异。LSD法应用于方差齐时的组间数据比较,Tamhane’s T2检验应用于方差不齐时的组间数据比较。
结果:1、蜗神经核葡萄糖代谢功能变化:对照组、假手术组、手术组和电针组左右两侧蜗神经核SUVmax左/右平均比值相比有统计学的差异(F=18.757,P=0.000)。与对照组相比,电针组、手术组的SUVmax平均比值增高(P电针组=0.002,P手术组=0.000),假手术组的平均比值无明显差异(P=0.228);与假手术组比较,电针组、手术组的SUVmax平均比值增高(P电针组=0.028,P手术组=0.000);与手术组比较,电针组平均比值降低(P=0.002);2、右侧蜗神经核ATP水平变化情况:四组右侧蜗神经核的ATP水平差异有统计学意义(F=369.129,P=0.000)。与对照组相比,手术组、假手术组和电针组右侧蜗神经核ATP水平降低(P手术组=0.000,P假手术组=0.000,P电针组=0.000);与假手术组比较,手术组、电针组右侧蜗神经核ATP水平降低(P手术组=0.000,P电针组=0.000);与手术组相比,电针组蜗神经核ATP水平升高(P=0.000);3、蜗神经核PINK1、SIRT1和LC3mRNA表达变化:四组豚鼠蜗神经核PINK1mRNA相对表达差异无统计学意义(F=1.192,P=0.327);LC3mRNA相对表达差异无统计学意义(F=0.762,P=0.523);SIRT1mRNA相对表达差异有统计学意义(F=3.374,P=0.029)。与对照组和假手术组比较,手术组SIRT1mRNA表达增高(P对照组=0.004,P假手术组=0.049);与手术组比较,电针组SIRT1mRNA表达降低(P电针组=0.033)。与假手术组、对照组相比,电针组SIRT1mRNA表达差异无统计学意义(P对照组=0.406,P假手术组=0.856);对照组与假手术组比较,SIRT1mRNA表达差异无统计学意义(P=0.313)。
结论:1、急性后循环缺血豚鼠蜗神经核葡萄糖代谢功能降低、ATP生成水平降低。2、SIRT1可能参与了急性后循环缺血豚鼠蜗神经核能量代谢的重塑过程。3、电针百会穴和内关穴可以改善急性后循环缺血豚鼠蜗神经核葡萄糖代谢功能,提高ATP生成水平。4、电针百会穴和内关穴可能通过调节SIRT1的表达促进急性后循环缺血豚鼠蜗神经核能量代谢功能的重塑。5、SIRT1-PINK1介导的线粒体自噬在急性后循环缺血豚鼠蜗神经核能量代谢功能重塑过程中的作用还需要进一步研究证实。