伊赫汤及姜黄素对硫代乙酰胺诱导的斑马鱼幼鱼肝纤维化的抑制作用

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研究目的:使用硫代乙酰胺诱导斑马鱼幼鱼肝脏病变,制作肝脏纤维化模型,并对肝脏面积、脂肪沉积、纤维化程度以及谷胱甘肽含量进行评估。之后分别监测两种保护肝的药物伊赫汤和姜黄素的修复效果,并探讨其作用机制。研究方法:选取受经后2 d(2 dfp)的斑马鱼幼鱼,用于0.06%的硫代乙酰胺水溶液的暴露,并培育至6 d构建肝纤维化模型。然后加入伊赫汤或者姜黄素处理并在28℃恒温箱孵育至8 dpf(处理3d),检测斑马鱼幼鱼肝指数、Tgf-β等纤维化相关基因转录水平的变化,并通过天狼星红染色、糖原染色以及谷胱甘肽含量的检测评估蛋白质水平变化。研究结果:硫代乙酰胺染毒8 d后,肝脏荧光面积下降,苦味酸天狼星红染色可见显著的胶原纤维沉积,谷胱甘肽含量降低,而伊赫汤组或姜黄素处理后显著恢复了硫代乙酰胺造成的各种指标的变化。硫代乙酰胺染毒显著升高了纤维化关联基因(Tgf-β、ACTA2、和Col1α1)基因表达的上升(P<0.05),而伊赫汤处理(0.5mg/g+TAA)抑制这些基因表达的上升(P<0.05),姜黄素处理后也表现出类似的表达趋势。以上结果表明硫代乙酰胺可制作肝脏纤维化模型,而伊赫汤和姜黄素都有显著抑制肝纤维化作用,这种作用可能通过抑制氧化应激产生。
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